组织工程为治疗软骨缺损提供了一种全新的治疗理念，现有组织工程产品临床应用效果的不肯定性，使得软骨组织工程研究必须不断深入和发展。本论文针对软骨细胞规模扩增及其与beta-TCP和液态胶原复合构建软骨等问题进行研究。 一、应用生物反应器微载体技术规模扩增人软骨细胞，为软骨组织工程研究提供大量具有成软骨能力的软骨细胞。通过检验细胞活性、测定细胞倍增时间、扫描电镜观察等来分析该技术相对于普通培养方法的扩增效果。同时分析两种微载体用于细胞规模扩增的优缺点。 二、扩增的软骨细胞复合生物陶瓷材料β-TCP进行成软骨实验。选用裸鼠做体内培育实验。通过组织化学及免疫组织化学染色等技术鉴定再生组织特性。 三、选用浓缩的液态鼠尾Ⅰ型胶原作为软骨细胞三维培养的载体，经体外铸形，构建具有一定形态的组织工程化软骨。并进行裸鼠体内培育实验。通过机械力学检测、组织学特种染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色等来鉴定构建物组织特性，并以正常软骨组织作为对照。 研究结果或结论主要有： 一、生物反应器微载体技术可以作为软骨组织工程种子细胞规模扩增应用技术，相比于MicroHex微载体，Cytodex—3微载体具有较好的扩增细胞效果。灌注式旋转生物反应器在规模化细胞培养上具有较多的优越性。 二、生物反应器微载体技术扩增的软骨细胞具有成软骨的再分化能力。大体观察为软骨样组织，甲苯胺兰染色显示组织呈异染性，Ⅱ型胶原免疫组织化学染色为阳性，而普通培养的组织显示局部阳性。 三、体外14d即可形成形态稳定的软骨组织，机械力学检测显示14d铸型物恢复形变所能承受的最大压强是(1.04±0.26)×10~5Pa，与7d铸型物(6.54±3.16)×10~3Pa具有显著性差异。病理学染色显示为透明软骨样组织。胶原支架已被完全降解。 研究展望：以期进一步完善生物反应器微载体技术，在组织工程化软骨产品开发方面进一步进行大动物实验，最终走向临床试验，形成软骨市场多产品并存的局面。