前言:作为全球第五常见的癌症,胃癌受到了公众的高度关注。胃癌是重要的恶性肿瘤之一,在因癌症死亡的病例中,胃癌在所有癌症中排第四。每年都有大量新的胃癌病例和因胃癌死亡病例,胃癌通常是由多种因素引起的,包括幽门螺杆菌,高盐饮食,低水果饮食,饮酒和吸烟。随着诊断标准和治疗方法的不断完善,胃癌的发病率和死亡率逐渐下降,但全球5年生存率仍然令人失望。新的胃癌治疗方案和预后判断指标备受关注,而对胃癌分子机制的研究对于胃癌的早期诊断,开发新的治疗药物策略以及改善预后有很大帮助。长链非编码RNA起初被认为是基因组转录的“噪音”,是RNA聚合酶II转录的副产物,不具有生物学功能。近年来随着对长链非编码RNA的研究不断深入,其功能逐渐明晰。长链非编码RNA是长度在200nt以上、不编码蛋白、但参与细胞内多种生物学过程的RNA分子。人类基因组计划研究发现只有3%的基因组序列是编码蛋白质的基因,而人基因组62%的序列转录为长链非编码RNA,这表明非编码区域可能通过表达长链非编码RNA参与生物学功能调控。哺乳动物蛋白编码基因占总RNA的1%,长链非编码RNA占总RNA的比例可达4%-9%。不同组织间长链非编码RNA表达量不同,同一组织或器官在不同生长阶段,长链非编码RNA表达量也会变化,并且长链非编码RNA在肿瘤与其他疾病中有特殊的表达方式。功能方面,长链非编码RNA可从染色质重塑、转录调控及转录后加工等多种层面实现对基因表达的调控。长链非编码RNA可通过折叠形成一定的空间结构与多种蛋白相互作用;也可通过碱基互补配对识别其他核酸,继而将蛋白引导至特定序列位点,这些特点使得长链非编码RNA在人类生长发育和癌症发生发展的过程中通过复杂的途径发挥不同的作用。目的:本研究旨在探索长链非编码RNA MCM3AP-AS1在胃癌细胞与组织中的表达水平,及其与胃癌发生发展及相关的临床病理特征之间的关系,并探索MCM3AP-AS1在胃癌中发挥作用的分子机制。第一部分通过生物信息学分析和体外实验检测胃癌中MCM3AP-AS1的表达情况,并分析其表达水平与临床病理特征之间的关系。第二部分通过体外功能实验和生物信息学分析,探索MCM3AP-AS1在胃癌的发生发展中所发挥的作用以及MCM3AP-AS1发挥作用的机制。研究方法:1.通过生物信息学分析探索MCM3AP-AS1在胃癌中的表达情况以及其与胃癌患者临床病理特征之间的联系。2.通过q RT-PCR实验检测MCM3APAS1在胃癌组织与细胞中的表达情况,并对胃癌患者的临床病理特征进行分析,以判断这些特征跟MCM3AP-AS1的联系。3.对胃癌细胞进行转染以抑制MCM3APAS1的表达,然后通过克隆形成、CCK8、细胞划痕和Transwell等体外功能实验探讨MCM3AP-AS1在胃癌细胞中可能发挥的作用。并通过功能和信号通路富集分析对MCM3AP-AS1的功能进行进一步的评估。4.通过相关性分析、Western Blot和功能试验,探讨MCM3AP-AS1与SETDB1之间的关系。结果:生物信息学分析的结果表明MCM3AP-AS1在胃癌中表达上调;MCM3AP-AS1的表达与患者预后不良相关;MCM3AP-AS1的高表达与高TNM分期显着相关。胃癌患者组织和胃癌细胞系的q RT-PCR结果与生物信息学分析结果一致,MCM3AP-AS1在胃癌中表达上调,且高表达的MCM3AP-AS1与高TNM分期相关。在MCM3AP-AS1敲低后,胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力都被明显抑制。KEGG通路分析结果表明,MCM3AP-AS1与粘着斑所参与的通路有关。GO分析结果表明,MCM3AP-AS1可能在调节翻译,蛋白质转运,DNA复制,细胞对缺氧的反应和细胞迁移中发挥重要作用。生物信息学分析还发现MCM3AP-AS1与SETDB1之间存在明显的相关性,于是我们通过q RT-PCR发现SETDB1在胃癌中的表达上调。接着我们通过Western Blot实验发现在敲低MCM3AP-AS1后,SETDB1蛋白的表达水平下降。更进一步的体外功能实验发现在敲低MCM3AP-AS1的胃癌细胞中过表达SETDB1,胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力都有明显提升,过表达SETDB1逆转了敲低MCM3AP-AS1对胃癌细胞的抑制作用。结论:1.MCM3AP-AS1在胃癌中表达上调,促进胃癌的增殖、迁移和侵袭。且MCM3AP-AS1的表达与胃癌患者的TNM分期和预后明显相关。2.MCM3AP-AS1可能通过SETDB1在胃癌中发挥促癌作用。