近年来随着干细胞研究的不断发展，新的研究工具和实验技术不断涌现，对精原干细胞(Spermatogonialstemcell,SSC)的研究亦激起人们的浓厚兴趣。在大鼠、小鼠、猪、牛等的SSC细胞已进行初步分离、培养和移植，并且SSC的体外培养研究方面，通过对不同种属精原细胞培养条件的不断摸索，应用不同成分的培养基(DMEM、DMEM/F12、无血清培养基、富含钾离子的KSOM培养基等)已建立了多种不同培养系统，以支持细胞(SertoliSC)作为饲养层建立了共同培养体系，以STO(小鼠胚胎成纤维细胞)无限系作为饲养层建立了生殖细胞培养系统等，但是SSC作为复杂精子发生过程的基础和前提，其生化和分子特性以及增殖、分化的生物学机理尚缺乏深入研究。针对目前睾丸SSC细胞的研究现状，本课题通过应用新生兔睾丸组织获得较高纯度的Sertoli细胞和SSC，然后选择不同的培养基和培养条件进行共培养，从而寻求SSC体外长期培养的优化培养体系，并为进一步研究SSC移植和功能鉴定奠定基础。 　　SSC细胞取自新生兔睾丸组织，应用联合酶消化法对睾丸组织进行消化，获得的单细胞悬液应用Percoll不连续密度梯度离心和差异粘附等方法进一步分离纯化得到兔精原细胞，然后以低渗处理法获得高纯度Sertoli细胞作为饲养层，接种在DMEM、DMEM/F12、DMEM-SF三种培养基中进行体外培养，通过光镜进行形态学观察，对短期培养条件下各组存活精原细胞的比例进行统计分析和共同培养体系进行了长期培养观察。