酒精性肝病（alcoholic liver disease,ALD）是全球最普遍的慢性肝病类型。ALD包含一系列表型,一般从酒精性脂肪肝开始,发展为酒精性肝炎、肝纤维化、肝硬化,并最终有发展为肝细胞癌的风险。但目前尚无安全有效的药物用于预防或治疗ALD。已有研究表明,ALD的发病机制包括氧化应激、细胞因子介导的炎症、肠道屏障的破坏、肠道生态失调等。肠道微生物已被认为可作为人体的一个额外器官。在正常条件下,肠道微生物保持着动态平衡,代谢产生各种生物活性物质,从而直接或间接地影响宿主健康。五味子是一种浆果,在传统中医中被用作治疗肝病的草药,是药食同源食品,具有较好的安全性。五味子果实含有多种生物活性成分,具有抗氧化、抗炎、抗衰老、肝保护、增强心血管功能、抗菌等作用。近年来的研究表明,调节肠道微生物可能是中药治疗疾病的重要机制之一。五味子改善酒精性肝病的效果及其通过肠道微生物介导的治病机制尚不清楚。本研究旨在探究五味子提取物对ALD的改善效果和作用机制,以及肠道微生物和代谢物在其中的作用。本论文主要包括以下研究内容:1.五味子提取物化学成分分析。五味子提取物通过高效液相色谱法和超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱质谱检测化学成分主要包括酚类、黄酮类、萜类、木脂素类、苯丙素类、氨基酸衍生物、生物碱类、有机酸及其衍生物等。经文献检索,这些化学成分主要有抗癌、抗氧化、抗炎、保肝、抗菌等药理活性。2.五味子提取物对小鼠酒精性肝病的预防作用研究。以小鼠慢性酒精喂养联合急性饮酒模型为基础,从病理学、免疫学角度评价小鼠肝脏和肠道状态,使用高通量测序分析肠道菌群组成,使用核磁共振氢谱和高效液相色谱分析肠道代谢物。五味子提取物能改善肝损伤、肝脏炎症,调节氧化应激和亚硝化应激;增强包括肠干细胞、肠道蠕动和紧密连接在内的小肠屏障功能;改善酒精摄入导致的小肠和盲肠生态失调,降低了埃希-志贺菌属（EscherichiaShigella）、肠球菌属（Enterococcus）、克雷伯菌属（Klebsiella）等微生物的比例,增加了乳杆菌属（Lactobacillus）、双歧杆菌属（Bifidobacterium）等益生菌的比例;调节了肠道微生物的代谢产物氨基酸、乳酸和短链脂肪酸的水平。通过体外细菌生长实验验证了五味子提取物选择性地抑制细菌生长。3.五味子提取物富集的肠道优势菌群对ALD的影响。利用体外胃肠道模拟系统和健康小鼠制备五味子提取物富集的小鼠小肠和盲肠优势菌群样本进行肠菌移植。肠菌移植改善ALD小鼠肝损伤、肝脏炎症;调节氧化应激和亚硝化应激;改善小肠和盲肠生态失调,降低了埃希-志贺菌属等的比例,增加了乳杆菌属、双歧杆菌属、毛螺旋菌科（Lachnospiraceae）、瘤胃球菌科（Ruminococcaceae）等短链脂肪酸产生菌的比例,在某些肠菌移植组中也观察到肠球菌属、克雷伯菌属比例的上升;调节了肠道乳酸和短链脂肪酸的水平。说明肠道微生物在五味子提取物治疗ALD中起到辅助作用,尽管小肠微生物在疾病进展中变化比盲肠微生物更敏感,但是小肠和盲肠内容物的肠菌移植对ALD的改善效果相似。4.五味子改善小鼠酒精性肝病中关键肠道微生物探究。选取产酸克雷伯菌（Klebsiella oxytoca）、粪肠球菌（Enterococcus faecalis）、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）、短双歧杆菌（Bifidobacterium breve）分别给予ALD小鼠,以及植物乳杆菌和短双歧杆菌混合给予ALD小鼠。植物乳杆菌和短双歧杆菌能改善肝损伤、肝脏炎症,调节氧化应激和亚硝化应激,改善肠道屏障功能,调节肠道菌群和代谢产物;粪肠球菌和产酸克雷伯菌对小鼠ALD起部分有益作用。抑制埃希-志贺菌属生长、增加乳杆菌属和双歧杆菌属等短链脂肪酸产生菌的比例,可能是五味子提取物改善酒精性肝病的关键微生物变化;粪肠球菌和产酸克雷伯菌的争议性作用仍需进一步研究验证。综上所述,五味子提取物能有效改善ALD,并调节肠道微生物组成和代谢产物水平,肠道微生物的变化与ALD的改善直接相关,其中埃希-志贺菌属、乳杆菌属和双歧杆菌属等短链脂肪酸产生菌可能是五味子提取物改善ALD的关键微生物。本研究为临床上使用五味子预防或治疗ALD提供有价值的参考,为粪菌移植中供体样本的处理提供了新的思路,为用微生物调节肠道菌群的治疗策略研究提供新的选择范围。