【摘 要】
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该文以黑曲霉中国株(3.758)总DNA为模板,用不同浓度的DMSO、甘油、甲酰胺对葡萄糖氧化酶(GOD)基因的PCR扩增的影响进行了实验.结果表明10﹪DMSO对葡萄糖氧化酶基因的特异扩增有
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该文以黑曲霉中国株(3.758)总DNA为模板,用不同浓度的DMSO、甘油、甲酰胺对葡萄糖氧化酶(GOD)基因的PCR扩增的影响进行了实验.结果表明10﹪DMSO对葡萄糖氧化酶基因的特异扩增有明显的促进作用.以黑曲霉中国株(3.758)总DNA为模板,用LA TaqDNA聚合酶进行PCR扩增获得1.8kb片段后,与pUCm-T载体连接,转化大肠杆菌DH5α,获得阳性克隆,经鉴定所获得的重组质粒为含全长GOD基因的重组质粒命名为pUCTGO.并对所获得的GOD基因cDNA进行序列测定、用RNAdraw软件分析了克隆基因的二级结构、用DNAssist version2.0软件分析了GOD基因的限制酶切图谱,最后将含有琥珀无义突变的位点通过PCR定点突变的方法将761处的A置换为G,使克隆到的基因成为编码完整酶蛋白亚基的功能葡萄糖氧化酶基因.
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