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肺癌为当今我国死亡率最高的癌症,多种因素可导致肺癌发生与恶化,烟草中的尼古丁(Nicotine, Nict)对肺癌的蔓延起重要作用。茶多酚中的两种重要单体成分——表没食子酸儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)、茶氨酸(L-Theanine)对癌症具有预防作用,但二者协同使用是否可拮抗肺癌细胞增殖及Nicotine对肺部组织的消极影响,还未见报道。本研究以MTT实验筛选出EGCG、Theanine、Nicotine对肺腺癌细胞H1299的最佳作用浓度;利用实时荧光定量PCR及Western blot技术检测EGCG、Theanine、Nicotine对H1299细胞中Bax、Bcl-2、Jak2和Stat3基因1nRNA、蛋白相对表达量的影响;选择茶多酚、白藜芦醇、维生素C、芦丁、槲皮素、绿原酸、花青素、原花青素8种抗氧化剂添加于香烟过滤嘴中,对人胚肾细胞HEK293进行MTT对比研究及运用Western blot技术分析其Bcl-2、Bax、STAT3蛋白表达量变化,探索茶多酚等抗氧化物对香烟烟雾损伤HEK293细胞的保护效能。实验结果表明:(1)EGCG对H1299细胞的半抑制浓度IC50值约为32μmol·L-1 (24h),Theanine对H1299细胞的半数抑制浓度IC50值约为250mmol-L-1(24h); Theanine和EGCG联合应用抑制肺癌H1299细胞表现为拮抗作用;Nicotine在1μmol-L-1时对H1299细胞具有明显促增殖作用。(2)以15μmol·L-EGCG、100mmolL-1的Theanine预处理H1299细胞24 h都可显著下调1μmol·L-1 Nicotine的促增殖作用。(3)1μmol·L-1的Nicotine处理H1299细胞可明显降低Bax基因mRNA的表达,上调Bcl-2、Jak2、Stat3 mRNA相对表达量;与1μmol·L-1的Nicotine单独处理组比较,15μmol·L-1 EGCG、100 mmol·L-1 Theanine预处理可反向调控Nicotine诱导所致JAK2/STAT3信号通路中Jak2、Stat3基因mRNA表达量的变化,但对Bax、Bcl-2基因mRNA的表达Theanine未产生显著性影响,而EGCG处理使其产生显著性差异(P<0.05)。(4)相较于空白对照组,EGCG对Jak2, Stat3蛋白的表达呈负相关效应,可使肺癌细胞H1299中Bax:Bcl-2比值增加,Nict单独处理可使肺癌细胞H1299中Bax:Bcl-2比值下降;相较与Nict单独模型组,经EGCG预处理后再以Nict处理的H1299细胞Jak2、Stat3有下降趋势,Bax:Bcl-2比值下降。(5)香烟烟雾可降低HEK293细胞存活率,呈浓度依赖关系;上调HEK293细胞中Bcl-2蛋白相对表达量,下调Bax、STAT3蛋白相对表达量,且各蛋白变化趋势呈浓度依赖效应;在过滤嘴中添加茶多酚等8种抗氧化剂明显抑制了香烟烟雾导致HEK293细胞死亡率增加,结果具有显著性差异(P<0.05),其中以茶多酚效果最佳。由此可知:EGCG、Theanine对Nicotine诱导的肺腺癌H1299细胞增殖起抑制作用,并且Bax、Bcl-2、Jak2和Stat3基因可能参与此作用的调控;添加茶多酚等8种抗氧化物于香烟过滤嘴中可对烟雾所致的HEK293细胞损伤产生一定的保护作用。