APCDD1(腺瘤性息肉下调1号)是一种跨膜糖蛋白,在体外可与Wnt经典信号通路的配体Wnt3a以及受体LRP5相互结合,从而抑制经典Wnt信号通路下游靶基因的激活,最终抑制了由经典Wnt信号通路激活所引起的各种生物学效应。我们知道,除了经典WNT信号通路,还有一个以Wnt5a配体为主的非经典WNT信号通路,该信号通路主要影响细胞和组织的极性以及细胞的运动能力。Wnt经典信号通路和非经典信号通路之间存在相互作用和互相调节,比如Frizzled蛋白就作为受体同时参与经典和非经典信号通路。因此,我们猜测,是否APCDD1基因也参与到Wnt非经典信号通路中发挥作用?我们首先利用免疫共沉淀技术(CO-IP)研究APCDD1蛋白与非经典信号的配体和受体之间的相互作用,结果发现APCDD1蛋白既能够与Wnt5a配体结合,又能够与重要的非经典信号受体Ror2相结合。而且,尽管APCDD1蛋白不能单独与非经典信号共受体Vangl2结合,但是如果在Ror2受体存在的情况下,则能够检测到APCDD1蛋白与Vangl2的结合,而同时添加Wnt5a配体则能进一步提高这种结合能力。因此,我们推测APCDD1蛋白作为非经典Wnt信号的受体,介导了细胞膜上Ror2-Vangl2-APCDD1复合体的形成,参与了非经典Wnt信号的调控。那么,APCDD1对于Wnt非经典信号的调控是抑制还是促进呢?通过检测非经典Wnt信号的重要转录因子c-Jun磷酸化,我们发现APCDD1能够提高该转录因子的磷酸化水平,提示APCDD1基因是促进Wnt非经典信号通路的。而且,细胞划痕试验也进一步的证实了这一观点:在NIH3T3细胞中过表达APCDD1蛋白后,能够显著提高损伤部位的细胞迁移速度,促进损伤愈合。综合以上结果,我们认为APCDD1蛋白作为受体同时参与并调节了经典和非经典Wnt信号通路,不同的是,APCDD1对经典Wnt信号通路的调节是抑制性的,而对于非经典Wnt信号通路则是促进的。以上这些发现将为进一步阐述APCDD1基因在Wnt非经典信号通路中的作用机制提供重要依据。接下来,我们将检测原代细胞里是否同样存在APCDD1蛋白与Wnt非经典信号受体Ror2的内源性结合,探讨APCDD1与Ror2受体之间的关系,以及探讨APCDD1是否参与调节经典和非经典Wnt信号通路之间相互作用。