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质体基因的正常表达对叶绿体的发育起着重要作用。质体基因编码的RNA聚合酶复合物(PEP)是叶绿体中主要的RNA聚合酶,其调节机制是十分复杂的。AtECB1是PEP复合物的一个新成员,它是PEP依赖的质体基因表达所必需的。拟南芥中有一个与AtECB1同源的蛋白AtECB1-Like/MRL7-Like(AT2G31840)。本论文研究了AtECB1-Like在植物叶绿体发育中对质体基因表达的调控机理。AtECB1-Like基因全长的CDS序列1053bp,其编码351个氨基酸残基的多肽,分子量大小为41.35KD。TargetP软件预测表明,其N端48个氨基酸残基为叶绿体前导肽序列,蛋白免疫印迹实验结果证实其主要定位在叶绿体基质中。拟南芥AtECB1-Like基因敲出的突变体atecb1-like为白化表型且是幼苗致死的。该突变体中叶绿体呈不规则椭圆形且空泡化严重,没有类囊体片层结构,也没有观察到淀粉粒结构。RNA干扰技术构建的AtECB1-Like-RNAi转基因植株,表现叶片延迟变绿的表型。融合MYC标签的AtECB1-Like的基因组序列能够成功互补atecb1-like突变体。这些结果证明AtECB1-Like是植物早期叶绿体发育所必需。定量RT-PCR分析结果表明,AtECB1-Like在拟南芥各组织中均有表达,其中幼苗中表达量最高。Northern杂交结果显示,atecb1-like突变体PEP依赖的质体基因psbA、psbB和rbcL的表达量明显下调。该突变体中叶绿体基因的这种表达模式同烟草Δrpo中叶绿体基因表达模式一致。这些结果说明,AtECB1-Like调控PEP依赖的质体基因的表达。利用35S强启动子驱动AtECB1的表达能够互补atecb1-like突变体的表型。这说明,AtECB1-Like和AtECB1在功能上是具有保守性的。序列分析发现AtECB1-Like具有一个硫氧还蛋白典型的结构特点βαβαββα的结构但是缺少了核心的C-X-X-C活性位点,取而代之的是一个S-X-X-C的结构。为了研究AtECB1-Like蛋白是否具有氧化还原活性,本论文构建了AtECB1-Like的原核表达载体。这为体外表达该蛋白研究其活性奠定了基础。综上所述,本论文的研究工作表明,AtECB1-Like和AtECB1在功能上具有保守性;类似于AtECB1,AtECB1-Like在高等植物叶绿体基因表达中起着重要的调控作用。