小柴胡汤联合环磷酰胺(CTX)对EAC肝癌小鼠细胞凋亡影响的实验研究

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目的:研究小柴胡汤联合环磷酰胺对小鼠EAC肝癌细胞的抗癌作用及机制。材料与方法:取40只昆明种小鼠。无菌条件下,右侧腋窝皮下接种浓度为2.0×10~6/ml的EAC肝癌小鼠细胞株0.2 ml/只,24小时后随机分成模型组、中药组、西药组、联合组。分别给予xcht、CTX、xcht+CTX处理小鼠,10天后处死全部小鼠,剥离肿瘤,计算抑瘤率;HE染色下观察肿瘤细胞形态学改变;透射电镜观察肿瘤细胞超微结构;免疫组化法测定Bcl-2蛋白表达。结果:1.各组小鼠一般状态:模型组小鼠毛色灰暗,运动迟缓,精神状态很差;中药组小鼠皮毛较光滑,运动略迟缓,精神状态较好;西药组小鼠毛色稍暗,运动迟缓,精神状态较差,有便溏,小鼠出现鼻出血;联合组小鼠皮毛光滑,运动灵活,精神状态很好。2.经药物治疗后,与模型组相比,各用药组的瘤重均有不同程度的减轻。用药组抑瘤率分别是中药组33.62%、西药组31.59%、中西药联合组38.85%。3.光镜下观察肿瘤细胞,模型组肿瘤细胞生长旺盛,肿瘤细胞较大,细胞核增大,染色较深,病理性核分裂像明显。中药组、西药组及联合组的肿瘤细胞生长受抑制,肿瘤细胞体积缩小,核固缩,核分裂像均少于模型组。联合组肿瘤细胞的排列较规则,异型性最小,分化最好,病理性核分裂像较少。4.电镜下观察肿瘤细胞,模型组肿瘤细胞多呈圆形或不规则形,胞质内可见线粒体、内质网膨胀,细胞核较大,核膜清晰,核仁明显。中药组、西药组及联合组的肿瘤细胞体积明显变小,核结构异常,染色质固缩,可见凋亡小体形成。联合组凋亡小体的数目多于中药组及西药组。5.免疫组化显示,中药组、西药组、联合组Bcl-2均阳性表达、灰度值均低于模型组,联合组降低最明显。结论:1.小柴胡汤联合环磷酰胺具有提高EAC肝癌小鼠生存质量的作用。2.小柴胡汤联合环磷酰胺具有抑制EAC肝癌小鼠肿瘤细胞生长的作用。3.小柴胡汤联合环磷酰胺具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。4.小柴胡汤联合环磷酰胺具有诱导EAC肝癌小鼠肿瘤细胞中Bcl-2表达下调,从而达到抑制肿瘤的作用。5.小柴胡汤联合环磷酰胺提高EAC肝癌小鼠生存质量,抑制其肿瘤生长的作用是通过诱导肿瘤细胞凋亡,抑制癌基因Bcl-2表达来实现的。6.小柴胡汤联合环磷酰胺具有降低毒副作用,增加药物疗效作用。
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