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肿瘤是目前影响人类健康的重要疾病之一,目前临床上治疗肿瘤主要依靠手术切除,放射治疗和化学药物治疗这3种手段。令人遗憾的是,尽管有着明显的治疗效果,上述3种手段都有着自身的缺陷往往不能根除体内肿瘤。目前普遍认为肿瘤的发生是建立在肿瘤细胞有效地逃避了机体免疫监视系统基础上的。因此通过某些手段激发出免疫系统对于逃逸肿瘤的反应性从而清除它们——肿瘤免疫治疗,被认为是一种很有前景的肿瘤治疗策略。在自身免疫系统介导的肿瘤清除中,细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）起着非常重要的作用——体外研究显示CTLs能通过对肿瘤细胞膜上肽MHC复合物（pMHC）特异性的识别来杀伤自身肿瘤细胞。利用肿瘤表位肽或负载肽的自身抗原递呈细胞（APCs）来免疫肿瘤病人就不失为一个很好的肿瘤免疫治疗手段。对于基于表位肽的肿瘤免疫治疗,选择一个合适的肿瘤抗原作为靶标就是有效治疗的先决条件。Cancer-testis抗原（CT抗原）家族由于其特殊的组织分布（只在肿瘤组织,睾丸和胎盘中表达）和强免疫原性被认为是合适的靶标。临床实验的结果也证实其作为靶标的可行性。KM-HN-1是2004年鉴定的一个新的CT抗原。该抗原广泛表达于不同组织来源的肿瘤中,而正常组织只有睾丸中能检测到它的表达。更重要的是该抗原能在病人体内同时激发体液和细胞免疫应答,这显示了其很强的免疫原性。基于以上2点,我们认为该抗原可能是一个很好的基于表位肽的肿瘤免疫治疗靶标。HLA-A*0201分子是在中国人群中分布最广的一个HLA-A分子,保守估计其人群中分布频率达到50%以上。所以本研究中,我们合成了可能与HLA-A*0201有效结合的CT抗原KM-HN-1相关肽,并利用其来鉴定KM-HN-1HLA-A*0201限制性CTLs表位。KM-HN-1 HLA-A*0201限制性CTLs表位的鉴定通过以下几步来完成:（1）KM-HN-1的HLA-A*0201限制性表位预测（2）肽HLA-A*0201结合亲和力及pMHC复合物稳定性分析（3）从健康人和肿瘤病人中体外诱导肽特异性的CTLs（4）利用负载肽的T2细胞和表达KM-HN-1及HLA-A*0201分子的肿瘤细胞对体外诱导的CTLs进行细胞杀伤实验和IFN-γ释放分析。通过上述工作,我们鉴定了2个KM-HN-1 HLA-A*0201限制性CTLs表位,分别是KM-HN-1321-329（KLLPFRETV）与KM-HN-1203-211（FLPTAPPNV）。表位特异性CTLs的细胞杀伤实验和IFN-γ释放分析表明肽KM-HN-1321-329（KLLPFRETV）与KM-HN-1203-211（FLPTAPPNV）能被细胞内源性递呈并从健康人和肿瘤病人外周血单核细胞（PBMC）中体外诱导出肽特异性的CTLs。其中肽KM-HN-1203-211（FLPTAPPNV）显示较强的免疫原性,可能是该抗原的免疫优势性表位。CT抗原KM-HN-1 HLA-A*0201限制性CTLs表位的鉴定将有利于我们进一步发展基于该抗原表位的肿瘤免疫治疗策略。