荷叶生物碱的提取分离纯化

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荷叶为卫生部批准的“可用于保健食品的物品”,现代临床广泛将荷叶应用于肥胖症及高血脂症,并取得了较好的疗效。药理研究显示荷叶生物碱类具有明显降脂减肥、抑制胆固醇、抗有丝分裂、抑菌和止痉挛等药理活性。目前有关荷叶生物碱的分离和制备的研究较少,本文主要报道了荷叶生物碱的提取工艺的优化、分离纯化进行了一系列的研究,为荷叶生物碱的进一步深入研究奠定了基础。现将主要研究结果报告如下:一荷叶生物碱的提取工艺采用热水提取法从荷叶中提取生物碱,对影响荷叶生物碱提取的四个主要因素――提取时间、提取温度、pH、固液比,在进行单因素实验的基础上,设计了L16(44)正交实验,以生物碱的提取率为指标,并通过极差、方差分析对这些因素进行了统计分析,并用人工神经网络对生物碱的提取工艺进行优化。确立了荷叶生物碱热水提取工艺:pH值2.5,提取温度85℃,提取时间1.75h,固液比1:35。二荷叶生物碱薄层层析鉴别荷叶生物碱在硅胶薄层板上用溶剂展开体系三氯甲烷:甲醇:二乙胺(90:9:1,V/V)展开,使荷叶中生物碱达到了较好的分离效果,此条件也可用于检测分离纯化效果。三高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化荷叶中的生物碱首次采用HSCCC成功分离了荷叶中的生物碱化合物。选择三氯甲烷:甲醇:pH4.00的水(4:3:2,v/v)为溶剂系统进行分离纯化,得到了三种组分,含量分别为94.13%、89.68%、92.25%。四高效液相色谱法(HPLC)分离纯化及定量分析建立了荷叶碱的高效液相色谱法(HPLC)定量分析,并利用制备型高效液相色谱对荷叶生物碱进行单体分离,分别得到了含量为98.78%、97.63%、99.99%的三种单体生物碱化合物。研究表明,采用人工神经网络和传统的正交实验相结合的分析方法建立了荷叶生物碱的提取工艺。薄层层析法对荷叶碱粗提物进行鉴别,高速逆流色谱和高效液相色谱两种不同方法都成功制备荷叶生物碱单体。
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