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[目的] 1.观察通络泄浊方对STZ诱导的糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用。 2.观察nephrin、podocin、α-actinin-4在大鼠肾组织中的表达。探讨通络泄浊方对nephrin、podocin、α-actinin-4表达的干预作用。 3.探讨通络泄浊方治疗糖尿病肾病的可能机制,为临床使用该方提供部分理论和实验依据。 [方法] 120只健康雄性SD大鼠,随机分为正常组和造模组。采用小剂量STZ(25mg/kg)联合完全弗氏佐剂(CFA)腹腔注射法建立糖尿病肾病大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分配至模型组、中药组、西药组和中西药组4组。(1)正常组:生理盐水灌胃(10ml·kg-1·d-1);(2)模型组:生理盐水灌胃(10ml·kg-1·d-1);(3)中药组:通络泄浊方灌胃(34g·kg-1·d-1)(4)西药组:氯沙坦科素亚灌胃(33.3mg·kg-1·d-1)(5)中西药组:通络泄浊方+氯沙坦。14周末处死大鼠,收集大鼠尿液测定24小时尿微量白蛋白排泄率;腹主动脉取血测定血清Scr、BUN、Alb;光镜和透射电镜观察肾脏病理;免疫组化和westernblot检测肾组织nephrin、podocin、α-actinin-4蛋白的表达;荧光定量PCR检测肾组织中nephrin、podocin、α-actinin-4mRNA的表达。 [结果] 1大鼠生化指标结果:与正常组比较,模型组大鼠血Scr、BUN、24h尿微量白蛋白排泄率(UARE)均明显升高(P<0.01),血清白蛋白Alb明显降低(P<0.01);而与模型组比较,各治疗组大鼠24小时尿微量白蛋白排泄率、血Scr、BUN均明显下降(P<0.01,P<0.05),血清白蛋白与模型组相比均没有统计学差异(P>0.05)。 2大鼠肾脏病理结果:灌胃给药8周后,病理结果显示正常组肾组织结构基本正常;模型组肾小球基底膜增厚、系膜细胞增生、系膜区基质增多,部分出现结节状硬化;各治疗组肾组织病理损伤较模型组明显减轻。 3大鼠肾组织免疫组化检测结果:模型组与正常组比较,肾组织中nephrin、podocin、α-actinin-4蛋白表达明显降低(P<0.01),各个治疗组与模型组比,肾组织nephrin、podocin、α-actinin-4蛋白的表达均有明显的提高(P<0.01)。 4大鼠肾组织Real-timePCR检测结果:模型组与正常组比较,肾组织nephrin、podocin、α-actinin-4mRNA表达明显降低(P<0.01),各个治疗组与模型组比,肾组织nephrin、podocin、α-actinin-4mRNA的表达均有不同程度的提高(P<0.05,P<0.01)。 5大鼠肾组织westernblot检测结果:模型组与正常组比较,肾组织中nephrin、podocin、α-actinin-4蛋白表达明显降低(P<0.01),各个治疗组与模型组比,肾组织nephrin、podocin、α-actinin4蛋白的表达均有明显的提高(P<0.01)。 [结论] 1.通络泄浊方对糖尿病肾病大鼠肾脏有明显的保护作用,能有效改善肾功能,降低肾重指数,减少蛋白尿。 2.通络泄浊方可能是通过上调DN大鼠肾组织nephrin、podocin、α-actinin-4mRNA和蛋白的表达而起到降低蛋白尿的作用。