核黄素转运蛋白2(Riboflavin transporter 2,RFT2),属于人核黄素转运蛋白家族,在小肠中高表达,主要功能是转运核黄素。以往大量的研究证明：　　1)食管癌高发区人群普遍缺乏核黄素;　　2)核黄素缺乏是促进食管癌发生的重要环境危险因素;　　3)通过食盐添加或给予药片,补充核黄素等微量营养素,与安慰剂组相比,能够显著降低食管癌高发区人群,但存在着明显的个体差异。　　这暗示着可能是核黄素转运蛋白,在食管癌高发区部分人群中发生了某些异常。近年,在食管癌中进行的一项全基因组关联分析研究发现,位于RFT2基因上游5622nt的一个SNP位点rs13042395是食管癌易感位点。目前,有关rs13042395位点是否能够调控RFT2基因表达,RFT2在食管癌中的表达模式及其功能等,均是未知的重要科学问题。在本论文中,我们对这些科学问题进行研究,实验结果概述如下。　　首先,对食管癌组织标本基因组DNA的rs13042395位点进行测序,鉴定不同基因型的分布比例,同时分析与临床病理资料及患者生存期的相关性。实验结果表明,与拥有CT基因型的患者相比,rs13042395位点CC基因型患者的生存期明显缩短,P=0.048。　　其次,报告基因实验结果显示,rs13042395位点,与T型等位基因相比,C型等位基因等位基因可以明显上调报告基因的表达;而报告基因、siRNA干扰、基因过表达以及EMSA等实验结果一致提示,rs13042395位点不同基因型调控下游基因表达的能力是由于结合了不同的转录因子所致。　　再次,免疫组化实验结果表明,与正常食管上皮组织细胞相比,RFT2蛋白在食管癌组织细胞中的表达定位发生了显著变化,在细胞膜上的表达明显减少,主要出现在胞浆及胞核;而胞核高表达的食管癌患者的生存率显著低,P=0.017。　　另外,在从食管癌细胞系克隆RFT2基因时,发现了一种新的剪切亚型,而免疫印迹实验发现该亚型编码了一较小的蛋白肽链,但具体定位在食管癌细胞的胞浆,还是胞核尚未确定。　　最后,在食管癌细胞上,基因过表达及RNA敲降实验结果表明,RFT2蛋白在胞浆和胞膜高表达会抑制癌细胞的增殖与移动能力,而敲降RFT2蛋白表达则会促进癌细胞的增殖与移动;回复实验结果表明,癌细胞的增殖与移动能力均有不同程度的抑制。　　综上所述可见,检测rs13042395位点的多态性可预测食管癌患者生存期,而RFT2蛋白的异常定位表达可以作为食管癌早期诊断的标志。