野西瓜是我国传统维药中的一种,目前已有研究证实野西瓜多糖可以通过线粒体途径诱导肿瘤细胞凋亡从而起到抑制肿瘤生长的效果,具有抗肿瘤药物的开发前景。硒多糖是近些年来关于多糖类药物研究的一个新兴课题,相关研究证明从香菇、木耳等多种植物中提取的硒多糖都具有较好的抗肿瘤活性,硒多糖既具有无机硒和多糖的抗肿瘤活性,同时又降低了无机硒对人体的毒副作用。具备研发抗肿瘤新药的筛选条件。因此本课题以此为切入点进行了更加深入的研究,本课题选用人胃癌细胞株SGC-790研究人工合成的野西瓜硒多糖对肿瘤细胞的抑制作用,首先通过MTT法、倒置显微镜观察法、荧光显微镜观察法和流式细胞仪PI单染法探讨了野西瓜硒多糖与SGC-7901细胞凋亡的相关性,之后应用激光共聚焦显微镜对肿瘤细胞中活性氧含量,钙离子浓度以及膜电位等与细胞凋亡密切相关的指标进行检测,对野西瓜硒多糖诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制进行初步探究,为进一步以野西瓜硒多糖为基础研制和开发抗肿瘤新药提供一定实验依据。本课题首先通过MTT法和倒置显微镜观察法考察了野西瓜硒多糖对人胃癌SGC-7901 细胞增殖的影响。结果表明,野西瓜硒多糖可以抑制人胃癌细胞 SGC-790 1 的细胞增殖,随着药液浓度的升高,肿瘤细胞的的生长抑制率也随之升高,二者具有正相关趋势;倒置显微镜对SGC-7901进行细胞形态学观察发现,给药后的细胞出现悬浮,活细胞数减少,随着给药浓度升高,现象越明显;证明野西瓜硒多糖对人胃癌SGC-7901增殖有抑制作用。之后采用荧光染色法和流式细胞仪PI单染法检测不同浓度野西瓜硒多糖作用下的SGC-7901细胞凋亡情况;荧光显微镜下观察结果显示,随着给药浓度的升高,凋亡小体的数量随之增加,细胞凋亡特征越发明显;凋亡率检测结果显示,随着给药浓度的升高,SGC-7901细胞的凋亡率也随之升高;二者呈现正相关性;实验在激光共聚焦显微镜下,观察在野西瓜硒多糖作用48h后的人胃癌细胞SGC-7901细胞活性氧(ROS)水平、Ca2+浓度变化情况以及线粒体膜电位变化情况,结果显示,随着野西瓜硒多糖浓度的增加细胞活性氧水平逐渐升高,细胞内的Ca2+浓度也随之升高,细胞线粒体膜电位下降。实验结果表明,野西瓜硒多糖可以通过诱导细胞凋亡从而抑制人胃癌细胞SGC-7901 细胞凋亡。在野西瓜硒多糖诱导细胞凋亡的过程中,细胞中活性氧(ROS)水平、Ca2+浓度以及线粒体跨膜电位可能起到十分重要的作用。实验结果表明野西瓜硒多糖能够可以升高肿瘤细胞中Ca2+浓度,从而改变肿瘤细胞内的稳定环境,促使细胞启动凋亡信号释放促凋亡物质引起细胞凋亡;野西瓜硒多糖还可以升高肿瘤细胞中ROS水平,氧化损伤细胞中一些大分子结构和细胞器如线粒体和内质网等,从而释放促凋亡物质最终导致细胞凋亡;除此之外,高浓度的活性氧还可以氧化损伤线粒体膜结构,并且造成细胞内Ca2+流入线粒体内造成钙超载,最终导致线粒体跨膜电位降低和线粒体膜通透性改变,释放与凋亡的细胞色素C等凋亡因子,激发与凋亡相关的蛋白。三者共同作用相辅相成最终导致细胞凋亡。