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鱼腥草药蔬兼用,原植物为三白草科蕺菜属蕺菜Houttuynia cordata Thunb.。具清热解毒,消痈排脓,利尿通淋等功能,是鱼腥草注射液的主要原料药。现代药理试验证明其具抗菌、抗病毒、利尿作用,还可增强机体免疫功能。目前,已被国家卫生部正式确定为“既是药品,又是食品”的极具开发潜力的资源之一,受到人们普遍关注。蕺菜属仅蕺菜1种。近年来,在四川峨眉山发现蕺菜属一新种峨眉蕺菜Houttuynia emeiensis Z.Y.Zhu et S.L.Zhang,该种在峨眉、乐山等地俗称白侧耳根,也作蔬菜和鱼腥草药用。 鱼腥草长期以来主要依靠采挖野生资源。然而,随着鱼腥草注射液销量的不断增加,鱼腥草新产品的问世,野生鱼腥草资源在药农的破坏性采挖下,蕴藏量呈逐年下降趋势,已渐渐不能满足生产所需,大规模人工栽培迫在眉睫。种质资源是育种的物质基础,是发现和利用基因资源的源泉。种质资源遗传多样性研究将为评估基因资源的开发前景以及引种栽培和资源保护提供重要信息。同时,种质资源评价,是实施鱼腥草生产质量管理规范(GAP)的保证。对其开展深入研究,将会为生产无公害道地药材,实现生产经营集约化和规范化以及走可持续发展道路奠定良好的物质基础,提供科学的理论依据。本研究从细胞学、同工酶以及分子水平上对鱼腥草种质资源进行了系统评价,并初步开展了鱼腥草新品种选育及配套综合栽培技术的研究,其主要结果如下: 1.细胞学观察结果表明,蕺菜染色体数目变化范围为36~126。其中,染色体数目36、54、72和126属首次发现,所有蕺菜材料中,以染色体数目81的出现频率最高。新种峨眉蕺菜染色体数目36也为首次发现。文中推测鱼腥草染色体基数可能为9,属典型的多倍体复合体。本试验还首次发现鱼腥草在其花粉母细胞二分体、四分体和花粉粒形成初期具核穿壁现象,其核物质转移可通过胞间连丝、接合孔和接合管进行。 2.过氧化物酶和酯酶同工酶分析结果表明,鱼腥草种质资源存在较丰富的同工酶变异类型,其栽培和野生类群酶谱类型一致。共有6种过氧化物酶和10种酯酶酶谱类型,每种过氧化物酶谱类型具4-6条酶带,酯酶酶谱类型具5-8条酶带。峨眉蕺菜和蕺菜种间亲缘关系较近,难以根据同工酶谱加以区分。试验结果还表明,随着染色体数目增加,鱼腥草种质资源过氧化物酶和酯酶谱带数有增加的趋势, 酶谱类型也逐渐丰富。过氧化物酶酶带数在纬度偏北地区相对较多,偏南地区相 对较少,酯酶酶谱在此范围内无地理分布差异。 3.用RAPD标记对92份鱼腥草种质资源遗传多样性进行检测。结果发现,34 个随机引物中有32个引物(94.1%)扩增产物具多态性。34个引物共得到200条 扩增DNA片段,其中93.5%的片段具多态性。每个多态性引物平均可扩增出5.8 个多态性片段。峨眉蔽菜和颤菜种内平均遗传相似系数(GS)分别为 0.52和 0.572, 二者种间GS值为0.sl7。峨眉颤菜与蔑菜中染色体数目为36的细胞型间相似程度 最高,其平均GS值达0.530。颤菜中,染色体数目为54以上的细胞型的类间GS 值几乎均是与染色体数目为36的细胞型间最小。栽培噩菜类群比其野生类群遗传 多样性相对较高。聚类分析表明,利用RAPD技术可将全部供试材料区分开,所 有材料共划分为 14类。其中,绝大多数(62个)聚为一类,根据 RAPD遗传相似 系数划分的类群同地理分布有一定关系。 4.鱼腥草种质资源的RAMP分析结果也表明,鱼腥草种质资源多态性水平较 高。所有引物扩增产物均具多态性,43个引物对共得到304条扩增DNA片段,平 均每个引物可获得7.1个DNA片段,其中97.7%的片段具多态性。每个多态性引物 能扩增出 410个洲A片段,平均可扩增出 6.9个多态性片段。峨眉颤菜和掇菜种 内平均遗传相似系数(GS)分别为0.660和0.575,H者种间GS值为0.525。峨眉 廉菜与颤菜中染色体数目为36的细胞型间相似程度最高,其平均GS值达0.599。 颤菜中,染色体数目为54以上的细胞型的类间GS值几乎均是与染色体数目为36 的细胞型间最小。栽培颔菜类群与野生类群遗传多样性基本一致,栽培类群遗传 多样性略丰富。聚类分析表明,利用MMP技术可将全部供试材料区分开,所有 材料共划分为 11类。染色体数目相同的材料有聚在一起的趋势,且根据 RAMP遗 传相似系数划分的类群同地理分布也有一定关系。 5.利用ISSR标记对70份鱼腥草种质资源遗传多样性进行检测,同样发现鱼 腥草种质资源的多态性水平较高。所有引物扩增产物均具多态性,22个ISSR引物 共得到352条扩增DNA片段,平均每个引物可获得16条DNA片段,其中92.3%的 片段具多态性。每个多态性引物能扩增出4-58条DNA片段,平均可扩增出14.8 条多态性片