半胱氨酸（Cys）,高半胱氨酸（Hcy）和谷胱甘肽（GSH）等生物巯基化合物,以及细胞中重要的活性氧之一––过氧化氢（H₂O₂）,在细胞的生理和病理过程中起着极其关键的作用。粘度作为细胞中一些疾病的信号物质,参与细胞中化学信号的传递过程。这些活性物质的预防和早期诊断十分关键。目前报道的使用荧光探针法检测这些生物小分子存在以下缺陷:（1）发射波长在较短波长处（<600 nm）;（2）对于Cys、Hcy和GSH的区分检测的荧光探针存在需要多个激发波长;（3）对于H₂O₂和粘度同时检测的荧光探针检测还不太成熟。在此拟通过对探针分子结构的调控来构建长波长发射的荧光探针,将其应用于生物检测。主要内容如下:1.将4-二氰亚甲基-2,6-二甲基-4H-吡喃与2,4-二乙氨基水杨醛偶联得到了具有长波长发射特征的荧光团（F1）,进一步与识别基团—2,4-二硝基苯磺酰氯（DNBS）反应,合成了荧光探针1。依据探针1的荧光-on原理实现对巯基化合物在长波长处的选择性检测。2.将荧光团F1与7-硝基-1,2,3-苯并恶唑（NBD）反应得到荧光探针2,探针2与Cys/Hcy发生亲核取代,释放荧光团F1和NBD-SR₁,NBD-SR₂（SR₁为Cys,SR₂为Hcy）,经过分子内重排反应形成有荧光发射的物质,而GSH与探针反应后由于存在分子内阻而不发生分子内重排,依据此原理实现对Cys/Hcy与GSH的区分检测。3.探针3的合成是基于苯并噻唑与共轭电子受体连接,形成π键共轭,存在扭曲分子内电荷转移过程,无荧光;随着溶液粘度增大,振动弛豫受到抑制,仍然保留了从苯并噻唑基团到吡啶环的较强的分子内电荷转移（ICT）,在680 nm处有较强的荧光发射。与H₂O₂反应,经1,4-消除反应后产物在590 nm处的荧光有荧光发射。基于以上原理,探针3可以实现对粘度和H₂O₂的双波长响应。