硼替佐米联合阿霉素对骨髓瘤细胞的协同促凋亡作用

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目的:1.探讨硼替佐米(bortezomib, Bor)联合阿霉素(adriamycin, Adr)对骨髓瘤细胞协同促凋亡作用;2.研究硼替佐米对黏附介导骨髓瘤细胞的阿霉素耐药逆转作用。方法:流式细胞仪测不同浓度硼替佐米和/或阿霉素对骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡的影响;运用金氏公式分析硼替佐米联合阿霉素的协同杀伤效应;醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)联合流式细胞术检测骨髓瘤RPMI8226细胞与纤连蛋白(FN)/正常人骨髓基质细胞(BMSCs)的黏附率;MTT法检测各组瘤细胞(①FN/BMSCs+Adr,②BSA+Adr,③Bor+BSA+Adr,④Bor+FN/BMSCs +Adr)的增殖活性,以分析硼替佐米对FN/ BMSCs黏附介导骨髓瘤细胞耐阿霉素的影响。结果:1.硼替佐米和阿霉素均可诱导RPMI8226细胞凋亡,其24小时IC50值分别为(51.23±4.36)nmol/L和(1.15±0.13)μmol/L;2.非抑制浓度硼替佐米(10nmol/L)与不同浓度阿霉素合用后,阿霉素对MM细胞的IC50值为(0.81±0.17)μmol/L,显著低于阿霉素单用(P<0.05),经金氏公式分析提示,两药对MM细胞杀伤呈协同效应;3. RPMI8226细胞与FN孵育2、12小时,黏附率分别为(55.78±1.56)%、(60.34±2.46)%;经非抑制浓度硼替佐米(10nmol/L)预处理后,其黏附率分别降为(34.24±1.29)%、(35.58±1.32)%,处理前后组间差异显著(P<0.05);4. RPMI8226细胞与BMSCs孵育2、12小时,其黏附率分别为(50.47±2.56)%、(61.27±3.86)%;经硼替佐米(10nmol/L)预处理后,2、12小时黏附率分别降为(40.54±1.29)%、(46.57±1.79)%,较处理前显著降低(P<0.05);5. FN黏附12小时后,阿霉素对瘤细胞的IC50值为(1.80±0.24)μmol/L,显著高于BSA对照组(1.18±0.13)μmol/L(P<0.05);经硼替佐米(10nmol/L)处理后,FN组阿霉素IC50值降至(0.93±0.09)μmol/L,与BSA组阿霉素IC50 (0.82±0.07)μmol/L相比无显著差异(P>0.05);6. BMSCs黏附12小时后,阿霉素对瘤细胞的IC50值为(1.87±0.24)μmol/L,显著高于BSA对照组(P<0.05);经10nmol/L硼替佐米处理后BMSCs组阿霉素IC50值降至(1.08±0.09)μmol/L,与BSA组相比无明显差异(P>0.05)。结论:1.硼替佐米联合阿霉素对骨髓瘤RPMI8226细胞具有协同诱导凋亡作用; 2.硼替佐米可降低骨髓瘤RPMI8226细胞与FN或BMSCs的黏附率;3.硼替佐米不仅能逆转骨髓瘤RPMI8226细胞与FN黏附介导的阿霉素耐药,而且同样能够逆转RPMI8226细胞与BMSCs黏附介导的阿霉素耐药。
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