短暂性脑缺血再灌注损伤对老年大鼠海马神经元凋亡及Caspase-3蛋白表达的影响

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目的 探讨短暂性脑缺血再灌注损伤对老年大鼠海马神经元凋亡及凋亡相关基因表达的影响。 方法 健康老年Wistar大鼠100只,以Pusinelli方法为标准建立四动脉阻断法全脑缺血模型,实验动物随机分为脑缺血1分钟组、脑缺血3分钟组、脑缺血5分钟组和假手术组,每组25只。每组又按再灌注时间分为再灌注12小时、1天、2天、3天和7天5个亚组,每个亚组5只。在预定时间点经心脏灌注固定后取脑制作石蜡切片,分别行HE染色、TUNEL法检测海马神经元凋亡,SABC免疫组化方法观察Caspase-3蛋白的表达。每组随机取一只大鼠冰上取脑行透射电镜观察神经元超微结构。 结果 假手术组及缺血1分钟组有少量神经元凋亡及Caspase-3蛋白表达,缺血3分钟及缺血5分钟后海马区神经元凋亡和Caspase-3蛋白表达明显增加。缺血3分钟及缺血5分钟组神经元凋亡及Caspase-3蛋白表达在缺血后再灌注12小时即有表达,在缺血后再灌注1天时达高峰,持续至第3天开始下降。电镜显示海马CA1区凋亡神经元呈现染色质边集、核不规则固缩等凋亡典型改变。 结论 老年脑对缺血再灌注损伤的敏感性增加,短暂的脑缺血即可造成老年大鼠海马神经元凋亡及Caspase-3蛋白表达的增加;Caspase-3与神经元凋亡有明显的相关性;再灌注后神经元凋亡及Caspase-3蛋白表达高峰出现的早,持续时间长。
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