论文部分内容阅读
目的:临床上,周围神经长段缺损行自体神经移植是首选方法,但是自体神经来源有限,并给供区造成一定的功能障碍,况且,神经生长速度为1mm/d,也是需要迫切解决的问题。目前解决神经缺损的方法集中在二个方面,一方面尝试肌桥、静脉管、硅胶管、组织工程等,但这些替代物的研究都处于实验阶段。另一方面即是用同种异体神经移植来进行修复,但存在免疫排斥反应问题,对同种异体神经预处理降低其抗原性的方法有化学法、冷冻法、干燥法、照射法等,都能降低其抗原性,还有应用免疫抑制剂、皮质激素,或同时应用都取得较好效果。周围神经损伤后其再生速度为1mm/d,是影响功能恢复的主要因素。肌肉长时间失神经支配后,肌纤维出现萎缩、变性和纤维化,彻底丧失功能恢复的可能。因此加速神经再生的速度,由现在的1mm/d提高到2-3mm/d,一直是基础和临床周围神经研究工作者的目标。因此,周围神经长段缺损需解解决二个问题:一为如何桥接神经缺损,二为如何加速神经再生。而新型免疫抑制剂FK506的问世,给加速神经再生提供了技术支持,FK506是从链霉菌属中分离出来的大环内酯类抗生素,英文名tacrolimus,常译为他克莫司或他克雷姆,商品名为普乐可复,FK506为实验室命名。它的主要作用(1)抑制器官移植排斥反应的作用,(2)促神经再生作用,(3)神经保护作用。临床上异体<WP=4>手移植发现,应用FK506可加速神经再生速度达3mm/d。故本实验设计(1)冷藏同种异体神经移植神经再生是否优于新鲜同种异体神经移植神经再生,(2)冷藏同种异体神经移植联合应用FK506神经再生是否优于单纯冷藏同种异体神经移植再生,(3)冷藏同种异体神经移植神经再生FK506的合适剂量,基于此我们设计了本实验。来探索出一种较好的进行同种异体神经移植的方法。方法:取75只雌性Winster大鼠做为受体,体重150—200g,按手术先后随机分为5组,每组15只,A组:新鲜同种异体神经移植组,B组:冷藏保存同种异体神经移植组,C组:冷藏保存同种异体神经移植组同时应用FK506剂量为2mg/kg/d,D组:冷藏保存同种异体神经移植组同时应用FK506剂量为0.5mg/kg/d,E组:新鲜自体神经移植组。另取30只SD大鼠,取其双侧坐骨神经共60根作为供体,其中15根用生理盐水浸泡30分钟直接移植于A组,其余45根依次浸泡于50%、70%、和85%甘油溶液中,每次3小时,然后分装盛有85%甘油溶液的无菌密闭瓶中,置于5°C条件下保存1周,移植前用生理盐水浸泡30分钟,分别移植于B、C、D组。各组均用11-0无创缝合线缝合神经外膜,将神经移植物与神经断端作端端吻合,术后A、B、E组不用任何药物,C组应用FK506剂量为2mg/kg/d灌胃8周,D组应用FK506剂量为0.5mg/kg/d灌胃8周,喂养条件、室温及管理条件完全一致。术后分别于8、10周对移植物行大体和光镜观察及轴突图像分析、比目鱼肌湿重比较、患肢坐骨神经电生理检查,于8周行移植神经电镜检查。对肌电图结果(传导速度、波幅、潜伏期)、比目鱼肌肌湿重、有髓神<WP=5>经纤维再生恢复率的原始数据采用SAS统计软件进行单因素方差分析,P<0.05提示有统计学意义。结果:术后8、10周时,通过对各组大体观察结果、显微解剖观察、光镜观察结果、电镜观察结果、电生理检测结果、比目鱼肌肌湿重结果的分析,3组中C、E组神经生长最好,D组神经再生好于A、B组,A、B组比较,A组较B组差。经过对肌电图、有髓神经纤维再生恢复率、肌湿重的统计学分析,有显著性差异(p<0.05)。结论:本实验结果说明,冷藏同种异体神经移植联合应用FK506组2mg/kg/d神经再生效果最好,与正常相似。冷藏同种异体神经移植联合应用FK506组0.5mg/kg/d神经再生效果次之,冷藏同种异体神经移植联合应用FK506组优于不用药组,而新鲜同种异体神经移植组神经再生效果最差。联合应用FK506和冷藏保存预处理同种异体神经可以加速同种异体神经移植后的神经再生及功能恢复。