江原钝绥螨(Amblyseius eharai)隶属蛛形纲、蜱螨目、植绥螨科、钝绥螨属,是一种重要的捕食性螨类,能捕食叶螨、粉虱、蓟马等多种农业害螨、害虫。目前对江原钝绥螨的研究主要集中在其生物学和生态学等方面,而对于参与该螨生殖调控的基因研究未见报道。卵黄原蛋白是近乎全部卵生生物卵黄蛋白的前体,卵黄的发生和胚胎的形成的关键物质,而卵黄发生是生物生殖调控的核心。本论文以江原钝绥螨为研究对象,运用RT-PCR结合RACE技术,获得江原钝绥螨卵黄原蛋白基因cDNA序列全长,并采用生物信息学的方法分析其序列特征。在此基础上,进一步使用实时荧光定量PCR技术探讨卵黄原蛋白基因在江原钝绥螨生长发育不同阶段以及不同食物饲喂处理后的mRNA表达水平。主要结果如下:1、江原钝绥螨卵黄原蛋白基因(AeVg,GenBank登录号:MH113158)的cDNA全长5637bp,包含5559bp的开放阅读框(ORF),编码1852个氨基酸残基,预测其分子质量为211.59 KDa,理论等电点(pI)为9.13。推导其氨基酸结构发现3个卵黄原蛋白典型结构域(LPD_N、DUF1943和VWD),两个蛋白酶切割位点RXXR,一个典型的GLCG特征基序,N-末端前16个氨基酸残基为信号肽。比对氨基酸序列分析发现江原钝绥螨与胡瓜钝绥螨相似度最高,高达90.6%,其次是巴氏新小绥螨,相似度为87.9%,而与害螨和蜱类的相似度较低。采用最大似然法(ML)构建了江原钝绥螨卵黄原蛋白基因和其它动物的系统发育树,结果表明江原钝绥螨与同属植绥螨科的另外两种螨(胡瓜钝绥螨,巴氏新小绥螨)亲缘关系最近,其次为蛛形纲的其他螨类与蜱类,蛛形纲、昆虫纲和软甲纲形成并列的关系。2、卵黄原蛋白基因在江原钝绥螨其生长发育不同阶段(卵、幼螨、前若螨、后若螨、雌成螨产卵前期、雌成螨产卵期、雄成螨)的mRNA表达水平差异较大,该基因在卵、幼螨、前若螨和雄成螨时期未表达,在后若螨时的表达水平极低,而在雌成螨产卵前期开始大量表达,雌成螨产卵期表达水平达到最高,是产卵前期的5.09倍,上述结果表明江原钝绥螨卵黄原蛋白基因可能与卵黄发生密切相关,自卵黄发生前期起大量表达,在卵黄发生过程当中表达水平最高。3、采用不同食物(椭圆食粉螨、朱砂叶螨、茶树花粉)饲喂江原钝绥螨后,检测Vg基因表达水平,结果表明:饲喂茶树花粉后Vg表达水平最高,是饲喂椭圆食粉螨后表达水平的1.19倍,差异不显著(P>0.05);而饲喂朱砂叶螨后,江原钝绥螨卵黄原蛋白基因的mRNA表达水平最低,这些结果表明人工饲养江原钝绥螨时使用替代食物椭圆食粉螨或茶树花粉均能达到较好的效果。综上所述,本论文在克隆得到江原钝绥螨卵黄原蛋白基因全长的基础上,进一步对该基因的表达模式进行分析,为后续进行该基因功能的研究奠定了基础,也为探讨江原钝绥螨的生殖调控提供一定的理论依据。