明永冰川低温噬菌体分离及其特征研究

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高山冰川是一类较为独特的生态系统,其低温、寡营养环境被认为是研究生命进化和地球环境演化等重大问题的“活化石”,同时,也是一个天然的微生物“储藏库”。对极端环境中生命和生态现象的研究为揭示生命环境适应性、自身演化提供了线索,为低温微生物资源的开发利用及人类健康开辟新的途径。本文以明永冰川及其退却地区样品为材料,采用经典的微生物纯培养方法及噬菌体分离纯化技术,以LB和PYGV为分离培养基,分离获得低温细菌197株,低温噬菌体17株。通过透射电镜对部分噬菌体形态学、生理生化特征、生物学特性、基因组限制性内切酶酶切、蛋白组成SDS-PAGE等进行了研究,所分离的噬菌体分属于长尾噬菌体科(Siphoviridae)、肌尾科噬菌体科(Myoviridae)、被脂噬菌体科(Corticoviridae)和复层噬菌体科(Tectiviridae)、基因组均为双链DNA (dsDNA),基因组大小27Kb-69Kb,均具有低温依赖性,热稳定性较差,所有噬菌体感染宿主的最高温度都远低于宿主细菌的最高生长温度。此外,对17株低温噬菌体宿主细菌的16S rRNA基因进行测序及相似性分析,结果表明所分离低温宿主细菌中假单胞菌属(Pseudomonos)、黄杆菌属(Flavobacterium)、芽孢杆菌属(Bacillus)和紫色杆菌属(Janthinobacterium)丰度较高,假单胞菌属为优势菌。17株宿主细菌均能在4℃快速生长,并且具有较宽的生长温度范围;其中MYB41-03P与MYB41-03Z可在4~45℃生长,属于耐冷菌(Psychrotrophs);所有细菌菌体形态为杆状,大多能够产生色素,除MYB2A-08、MYB2B-10、MYB41-03P、MYB41-03Z和MYB41-22为革兰氏阳性菌外,其余12株为革兰氏阴性细菌。本研究为进一步深入了解明永冰川地区宿主细菌与噬菌体相互作用机制,适冷机制、细菌与噬菌体的协同进化关系等奠定了基础。
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