NDRG2在小鼠创伤性脑损伤中的时空表达及其血清浓度与患者预后的相关性研究

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第一部分:NDRG2在创伤性脑损伤小鼠模型中的表达及意义目的:探讨NDRG2在小鼠创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后的时空表达及其与神经细胞死亡的相关性。方法:将雄性ICR小鼠随机分为七组:sham、TBI 6h、TBI 12h、TBI 24h、TBI 48h、TBI 72h、TBI 7d。采用重物自由落体法制备小鼠闭合性脑损伤模型。采用免疫蛋白印迹法检测TBI小鼠伤灶附近脑组织中NDRG2蛋白水平的变化情况。采用免疫荧光法分析小鼠TBI后NDRG2的细胞和亚细胞定位及其与细胞凋亡的关系。结果:免疫蛋白印迹结果显示NDRG2蛋白在TBI后12h开始显著升高,24h达到峰值,1周内缓慢下降。免疫荧光结果显示TBI后24h伤灶附近脑组织NDRG2荧光信号显著增强且特异性定位于星形胶质细胞,并伴随着明显的核转移。TUNEL/NDRG2荧光双染结果显示NDRG2信号与TUNEL阳性细胞存在共定位现象。结论:NDRG2在TBI后12-24h蛋白表达逐渐达到峰值,且特异性表达于星形胶质细胞。在伤灶附近,NDRG2明显核转移且NDRG2的高表达伴随着细胞凋亡,提示NDRG2可能参与TBI后细胞凋亡的发生发展。第二部分:脑外伤患者血清中NDRG2水平与预后的相关性研究目的:检测创伤性脑损伤患者伤后1周内血清NDRG2水平,并探讨其与伤情和预后的相关性。方法:前瞻性收集41例创伤性脑损伤患者和39例正常人血清标本,采用双抗夹心ELISA法检测患者伤后第1天,第2-4天、第5-7天血清中NDRG2水平,并收集患者临床资料做相关统计学分析。结果:1)TBI患者伤后1周内血清中NDRG2水平显著高于对照组(p<0.05);2)Spearman线性相关分析显示TBI患者第1天血清NDRG2水平与GCS评分(r_s=-0.388,p=0.012)、瞳孔反应(r_s=0.392,p=0.011)、GOS评分(r_s=-0.371,p=0.017)相关;3)Logistic回归分析结果显示TBI患者第1天高血清NDRG2浓度是预后不良的独立危险因素(OR=2.641,p=0.057),ROC曲线分析结果显示曲线下面积(AUC)为0.797,截断值是1.03ng/ml。结论:血清NDRG2水平与脑外伤患者伤情相关,伤后第1天高血清NDRG2浓度是TBI患者6个月后不良预后的独立危险因素。因此,早期检测血清NDRG2浓度对评估TBI患者的预后具有潜在参考价值。
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