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目的:观察鱼藤素对胃癌AGS细胞抑制增殖和诱导凋亡的作用,初步探讨其作用机制。
方法:体外培养人胃癌AGS细胞,采用MTT法检测药物对胃癌细胞生长的抑制作用。用Hoechst33342/PI荧光染色观察凋亡细胞的形态。Annexin V FITC/PI双标记法流式细胞仪检测细胞凋亡率,流式细胞仪分析细胞周期,细胞线粒体膜电位变化。用免疫细胞化学法检测鱼藤素处理后AGS细胞p-Akt、COX-2、NF-κB和Caspase-3蛋白的表达。
结果:鱼藤素显著抑制人胃癌AGS细胞的生长,呈浓度和时间依赖性;鱼藤素(80nmol/L)处理AGS细胞48h后,荧光显微镜下观察到,细胞体积缩小,核固缩,呈典型的凋亡形态学改变;Annexin V FITC/PI双标记法流式细胞仪检测细胞凋亡显示随鱼藤素浓度的增大,AGS细胞凋亡率明显上升。流式细胞术分析结果表明不同浓度鱼藤素(0,10,20,40,80,160nmol/L)处理AGS细胞48h,使细胞周期聚积于G0/G1期,并且能降低细胞膜电位;鱼藤素以剂量依赖式使p-Akt、COX-2、NF-κB蛋白表达降低,Caspase-3表达增加。
结论:鱼藤索能够抑制人胃癌AGS细胞增殖,并诱导细胞凋亡,使AGS细胞阻滞于G0/G1期,并且可降低细胞线粒体跨膜电位,其抗肿瘤机制可能与下调p-Akt,COX-2,NF-κB的表达,活化Caspase-3有关。