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背景:缺血性脑卒中是致残和致死的重要疾病,其神经保护治疗非常重要,但目前其临床研究结果令人失望,原因之一可能与人们对缺血性脑卒中的神经保护只注意神经元胞体即灰质的保护,而忽略了对白质的保护有关。现代证实:脑卒中后白质损伤是神经功能障碍的重要原因,且白质对缺血高度敏感。临床上针刺对一些脑外伤后轴索损伤进行治疗有一定的疗效,针刺是否可以通过对缺血性脑卒中后受损髓鞘的保护来发挥其治疗作用尚未见报道。目的:建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,探讨针刺对缺血脑卒中大鼠受损脑髓鞘的保护作用。方法:(1)选取体重在250~300g的健康雄性清洁级SD大鼠141只,用随机数字表的方法随机分成以下五组:正常组(N,n=12)、假手术组(C,n=21)、缺血再灌注模型组(非针刺组,C+,n=36)、早期针刺组(E2,n=36)、晚期针刺组(E3,n=36)。(2)采用改良的线栓法制备右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)的局灶性脑缺血再灌注模型,分别于造模后不同时间点采用“醒脑开窍”针刺法对E2、E3组进行针刺干预。E2组是在缺血30 min时开始第一次针刺,E3组是在缺血2 h拔线实现再灌注时给予第一次针刺。N、C+、C.组大鼠在实验开始后不同的观察时间点均用鼠夹固定相同的时间,不进行针刺。(3)应用EHISA法、神经功能缺损评分法、Pal-Weigert髓鞘特殊染色法、半定量RT-PCR法、实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法对各组大鼠在造模前及实验开始后1d、3d、5d、7d时的血清MBP含量、神经功能恢复情况、缺血灶的髓鞘再生和MBP基因转录水平进行动态观察。(4)此外,为了更好地比较针刺组和非针刺组的神经功能恢复情况,在进行神经功能缺损评分时,观察时间点又增加了一个造模后2.5 h。结果:(1)与造模前相比,非针刺组血清MBP含量明显升高(P<0.05),在3d时达峰值(54.287±3.170vs1.447±0.079);神经功能缺损评分下降缓慢(P<0.05),在2.5h时为2.8±0.447分,3d时为2.2±0.447分;内囊有明显的髓鞘脱失且恢复缓慢;脑MBPmRNA的含量随着时间的推移逐渐升高,在7d时,RT-PCR结果为(1.03±0.023vs0.52±0.016)(P<0.05),FQ-PCR结果为(6.96±0.111vs 1.22±0.424)(P<0.05)。(2)与非针刺组相比,除造模前外,针刺组在其余时间点的血清MBP含量升高的幅度明显降低(P<0.05),其中早期针刺组的峰值为13.838±1.094,晚期针刺组的峰值为18.946±3.387;神经功能缺损评分下降的速度快,早、晚期针刺组在3d时均为1.6±0.548分(P<0.05);髓鞘脱失程度明显减轻,并可看到明显的髓鞘再生;脑MBPmRNA含量随着时间的推移迅速增高(P<0.05),在7d时,早期针刺组的RT-PCR结果为(1.95±0.0241vs1.03±0.023),FQ-PCR结果为(17.90±0.258vs6.96±0.111),晚期针刺组的RT-PCR结果为(1.45±0.071 vs1.03±0.023),FQ-PCR结果为(13.13±0.263vs 6.96±0.111)。(3)与晚期针刺组比较,早期针刺组的血清MBP含量在第5d达到峰值,晚期针刺组在第3d达到峰值;早期针刺组神经功能缺损评分的下降速度较快,在7d时,早期针刺组与非针刺组的差别明显(0.6±0.548 vs 1.2±0.447)(P<0.05),晚期针刺组与非针刺组的差别不明显(0.8±0.447 vs 1.2+0.447)(P>0.05);早期针刺术后第1d时内囊的髓鞘脱失似乎较轻;其脑MBPmRNA含量增高的幅度更高、速度更快(P<0.05),在第7d时其FQ-PCR结果为(17.90±0.258 vs13.13±0.263)。结论:本研究结果提示:(1)通过改进大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的造模方法,使线栓法制备MCAO模型的成功率提高,手术难度降低。(2)缺血对脑自然恢复机制的激活作用是有限的。(3)针刺能影响缺血性脑卒中大鼠血清MBP含量的动态变化。(4)针刺对缺血性脑卒中大鼠的受损髓鞘具有保护作用,此作用可能是通过明显刺激MBP基因的转录,使MBP合成增多,促进髓鞘再生,从而使大鼠的神经功能恢复。(5)在脑缺血后,针刺治疗开始越早,对髓鞘的保护作用越大。(6)本研究从血清学、形态学、神经功能评分和基因水平显示针刺对缺血性脑卒中受损髓鞘具有保护作用,但还需更多的研究予以证实。