【摘 要】
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该研究采用P-gp表达阴性,对顺铂(DDP)等多种化疗药物耐药的卵巢上皮癌细胞株COC/DDP及其亲本敏感株COC为研究对象,以MTT技术观察无毒性剂量米非司酮体外逆转COC/DDP细胞对顺
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该研究采用P-gp表达阴性,对顺铂(DDP)等多种化疗药物耐药的卵巢上皮癌细胞株COC<,1>/DDP及其亲本敏感株COC<,1>为研究对象,以MTT技术观察无毒性剂量米非司酮体外逆转COC<,1>/DDP细胞对顺铂的耐药性;建立卵巢癌裸鼠移植瘤耐药模型,观察米非司酮体内增强卵巢癌对顺铂的敏感性;利用分子生物学和细胞生物学的技术,观察米非司酮对葡萄糖神经酰氨合成酶表达的影响,初步探讨其增敏机制.为卵巢癌耐药逆转研究提供新的思路,为米非司酮作为MDR修饰剂用于卵巢癌的化疗提供理论依据.方法:一.以RU486为MDR修饰剂,体外细胞毒性实验观察人卵巢癌细胞耐药亚株COC<,1>/DDP对DDP的耐药性、RU486对COC<,1>/DDP的增敏效应.二.采用COC<,1>/DDP建立人类卵巢癌裸鼠异种移植瘤耐药模型,检测应用RU486后荷瘤裸鼠肿瘤体积变化,光镜、电镜观察移植瘤和裸鼠各主要脏器的形态学变化.三.RT-PCR技术分析COC<,1>/DDP细胞以及亲本株COC<,1>细胞GCS在mRNA水平的表达,分析COC<,1>/DDP细胞耐药性逆转前后和瘤组织GCSmRNA表达的变化;Western blot技术分析COC<,1>/DDP及COC<,1>细胞GCS蛋白质水平的表达变化.结论:一.米非司酮可以在体外逆转COC<,1>/DDP细胞对DDP的耐药性,并具有明显的剂量依赖效应;二.无毒性剂量米非司酮可以在体内增加COC<,1>/DDP对DDP的敏感性;三.米非司酮可作为MDR修饰剂应用于卵巢癌的化疗.四.细胞GCS在基因和蛋白质水平的表达影响卵巢癌MDR细胞COC<1>/DDP对DDP的矩形性.GCS过度表达可能是卵巢癌MDR的一种新机制;五.米非司酮逆转卵巢癌对DDP的耐药与抑制GCS表达有关.调节GCS在mRNA和蛋白质水平的表达,可能是一种新的逆转MDR途径.
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