胚胎及新生大鼠脑组织Nestin NSE GFAP表达的改变

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sxhh122
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目的:研究不同发育期脑组织Nestin、NSE、GFAP的相对数量及空间分布状况,探讨脑的神经发育规律,为后期研究选择恰当发育期的实验动物,确定取材部位,分离富集和增殖均质的神经干细胞,神经干细胞定向分化及移植治疗,建立大鼠胚胎发育期与人类胚胎发育阶段之间的对应关系等研究工作提供实验依据。方法:将Wistar大鼠按胎龄与日龄分组,将整脑取出。一方面,经固定、包埋、制备不同脑平面的石蜡切片,用SABC免疫组化染色法检测不同发育期Nestin、NSE、GFAP的空间分布;另一方面,制备单细胞悬液,经间接免疫荧光标记Nestin、NSE、GFAP抗原,用流式细胞术检测其荧光表达的百分数,并进行分析。结果:1.从E12至P9整个研究阶段均有Nestin表达,出生前显著高于出生后;表达具波动性,E12表达最高,E16至E18出现第二个表达高峰。E12可见神经嵴大量Nestin阳性细胞散在分布于神经管和外胚层之间。E16已可见Nestin阳性表达细胞分布于局限区域。2. NSE于E14开始有明显表达,始见于网状结构区域,尚未形成神经核团结构。于E16,网状结构区域NSE分布局限,聚集成团。E16可见NSE存在于皮层下折叠中;P3表达出现最高峰。3.GFAP于E12有少量表达,于E16开始明显表达并逐渐升高,逐渐稳定于成鼠的表达量。结论:1.脑神经干细胞表达Nestin始于胚胎发育早期,整个研究阶段表达水平具有波动性,出生前明显高于出生后。E12期及E16至E18期出现两个表达高峰,出生后表达水平显著下降,P9已近成鼠(P90)表达量。2.E14开始出现神经元,位于网状结构区域,尚未形成神经核团结构,于E16可见神经元迁移至皮层下;从E14至P9神经元数量波动,P3百分比最高, 之后逐渐下降,趋于成体水平。3.RGC(表达Nestin GFAP)可能出现于胚胎早期。4.星形胶质细胞(表达GFAP)开始形成于E16,以后数量逐渐增加,趋于成鼠量。
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