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原花色素为多羟基酚类化合物,衍生于黄烷类化合物,属生物类黄酮。它具有独特的化学和药理活性,可在许多领域中获得广泛的应用。对其进行研究开发具有十分重要的现实意义。 研究工作主要分4个方面:(1) 比较70%乙醇、70%甲醇和70%丙酮的原花色素提取率,比较60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇的原花色素提取率,对温度、酸碱性、提取时间、料液比对原花色素提取率的影响进行研究;(2) 采用冷却沉淀、盐析结合溶剂分级法对原花色素进行初级分离,对产品进行高压液相色谱和质谱分析并测定原花色素含量,考查加盐量、pH值对低聚原花色素获得率的影响,研究溶剂直接分级法低聚原花色素的获得率;(3) 对大孔吸附树脂AB-8和葡聚糖凝胶LH-20进行原花色素的静态吸附试验、静态解吸试验、动态解吸试验,对大孔吸附树脂AB-8进行原花色素的动态吸附试验;(4) 试验对葡萄籽原花色素的还原能力、对亚油酸过氧化的抑制作用、对羟自由基的清除作用、对超氧阴离子的清除作用、对亚硝酸根离子的清除作用进行测定,并与VC,BHT进行比较。 研究结果表明: (1) 原花色素溶剂提取采用1:4的料液比,粉碎10目左右,70%的乙醇或丙酮室温酸性环境下浸提8~10 h的条件较为适宜。此路线具有提取率高,易过滤等特点。 (2) 冷却沉淀、盐析结合溶剂分级法对原花色素进行初级分离可得四种产品。产品1和产品2为高聚原花色素,产品3和产品4为寡聚和低聚原花色素的混合物,产品3具有良好的水溶性。对于本方法,每100ml液体加入6.0gNaCl进行盐析是较为适宜的。pH=3.5较有利于乙酸乙酯对低聚原花色素的萃取。有机溶剂直接分级法由于叶绿素的影响效果不如冷却沉淀、盐析结合溶剂分级法。冷却沉淀、盐析结合溶剂分级法具有方法简便,成本低廉,原花色素获得率较高,产品无毒无害,低聚原花色素产品纯度高,水溶性好等特点。 (3) SephadexLH-20和AB-8对原花色素均具有较强的吸附能力,在1小时内均快速吸附水溶液中的原花色素,1小时后基本达到吸附平衡,其中LH-20无论吸附量还是吸附速率均优于AB-8。较低的流速有利于原花色素的充分吸附和解吸,但太低的流速不利于生产,对于本试验所用AB-8大孔吸附树脂层析柱,1.5ml/min的上样和洗脱速率是较适宜的。产品3可能主要为原花色素二聚体和三聚体的混合物。AB-8对原花色素的分离效果不如SephadexLH-20。 (4) 一定浓度范围内,葡萄籽提取物的还原能力随着浓度的增加而增强。当浓度低于lm岁ml时,葡萄籽提取物对亚油酸的过氧化表现出一定的诱发效应,随着浓度的增加,葡萄籽原花色素对亚油酸过氧化的抑制作用也逐渐增强。葡萄籽原花色素对轻自由基的清除作用随着浓度的增加而增强,当浓度为600mg/L时,对轻自由基的清除率可达%.8%。在低浓度条件下,葡萄籽原花色素对邻苯三酚自氧化的抑制作用较弱,在高浓度条件下具有显著的抑制作用。在光照核黄素体系中,不同浓度的葡萄籽原花色素对超氧阴离子均具有显著的清除作用。明显优于同浓度的V。。在低浓度条件下,葡萄籽原花色素对亚硝酸根离子的清除作用较弱,但随着浓度的增大,葡萄籽原花色素对亚硝酸根离子的清除作用也明显增强。原花色素抗氧化性能优于vc和BHT,是一种优良的纯天然抗氧化剂。