【摘 要】
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茶碱为甲基黄嘌呤类化合物,通过舒张呼吸道平滑肌进而提高氧气摄入量,同时兴奋中枢神经进而提高运动成绩。同时又是违禁药物咖啡因主要代谢产物和共性化合物,因此茶碱成为速度赛马最常被检出的违禁药物之一。为建立快速、准确、高灵敏度的茶碱残留检测方法,完善茶碱自初筛到确证的定量方法,填补内地马兴奋剂检测空白,促使我国赛马兴奋剂检测与国际水平接轨,本研究对其进行了系统性的方法开发。本实验选择氘代茶碱作为内标物,
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茶碱为甲基黄嘌呤类化合物,通过舒张呼吸道平滑肌进而提高氧气摄入量,同时兴奋中枢神经进而提高运动成绩。同时又是违禁药物咖啡因主要代谢产物和共性化合物,因此茶碱成为速度赛马最常被检出的违禁药物之一。为建立快速、准确、高灵敏度的茶碱残留检测方法,完善茶碱自初筛到确证的定量方法,填补内地马兴奋剂检测空白,促使我国赛马兴奋剂检测与国际水平接轨,本研究对其进行了系统性的方法开发。本实验选择氘代茶碱作为内标物,固相萃取法为样本前处理方法,液相色谱串联三重四极杆质谱仪(Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry,简称LC-MS/MS)为检测手段,建立马尿液和血液中茶碱残留检测方法。本实验首先建立茶碱及内标物仪器检测方法,然后对样品前处理流程进行细致优化,最后进行方法学考察。方法学数据结果如下:茶碱在尿液和血液中检测限分别为0.75ng.mL-1和0.30 ng·mL-1,定量限为 2.50ng·mL-1 和 1.00ng·mL-1;茶碱在尿液 2.50ng·mL-1～100.00ng·mL-1线性范围内及在血液1.00ng·mL-1～100.00ng·mL-1线性范围内线性相关系数r2均大于0.999;在尿液中提取回收率为65%以上,在血液中高达97%;在尿液和血液中相对回收率分别是94.85%～116.25%,98.93%～114.49%;批内精密度RSD均小于3.81%,批间精密度RSD不大于15.53%;血清基质对茶碱离子化有较强抑制作用,而尿液基质的抑制作用较弱。上述结果表明该方法操作简单,灵敏度高,结果可靠完全适用马兴奋剂中茶碱残留的定量确证。
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