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Angiomotin (AMOT)是一个在内皮细胞(ECs)表达的膜相关蛋白,它能够调控迁移,紧密连接(TJ)形成,细胞极性以及血管生成。在最近的研究中也揭示了AMOT,以及两个AMOT家族成员AMOTL1和AMOTL2都通过调节共转录因子YAP/TAZ的亚细胞定位,从而在Hippo pathway中发挥了重要的作用。但是,在细胞中AMOT受到了哪些调控目前为止还不是特别清楚。在本实验中,我们发现了AMOT在细胞受到泛素化降解。当293T细胞用蛋白酶体抑制剂MG132或者lactacystin处理后,AMOT蛋白量显著升高。由于AMOT受到泛素蛋白酶体系统调控,我们便寻找负责介导AMOT泛素化的相关E3连接酶。在多个物种的AMOT同源蛋白序列比对分析中,我们发现在AMOT/p130, AMOTL1和AMOTL2的N端部分都含有三个保守的L/P-P-X-Y motifs(除了AMOT/p80)。而L/P-P-X-Y motifs可以和含有WW domain的蛋白质相互作用,比如说Nedd4-like E3 ubiquitin ligases家族。所以我们对一些Nedd4-like E3 ubiquitin ligases家族成员做了一遍筛查,发现Nedd4,Nedd4-2和Itch可以降解AMOT的长剪接本AMOT/p130,而不能降解其短剪接本AMOT/p80。我们的数据显示Nedd4,Nedd4-2和Itch可以有效降解AMOT/p130,并且其降解作用呈剂量依赖效应,并且Nedd4, Nedd4-2和Itch也可以促进AMOT L1的降解,但是却不能促进AMOT L2的降解。我们证明了Nedd4,Nedd4-2和Itch能够在体内对AMOT/p130进行泛素化修饰。而且超表达Nedd4,Nedd4-2和Itch可以导致AMOT/p130的泛素化降解。我们发现Nedd4, Nedd4-2和Itch的HECT domain的泛素连接酶活性对介导AMOT/p130的泛素化降解至关重要。Nedd4介导的AMOT/p130泛素化降解可以被蛋白酶体抑制剂MG132完全逆转。并且野生型的Nedd4可以促使细胞内AMOT/p130蛋白衰减,而Nedd4 CA酶失活型突变体则不能。用小RNA片段干扰消减Nedd4,Nedd4-2和Itch,会导致细胞内AMOT/p130蛋白水平上升。我们也证明了AMOT/p130的三个L/P-PXY motifs和Nedd4的WW domains介导了两者间的相互作用。更进一步的讲,Nedd4-like ubiquitin E3 ligases可能通过与YAP竞争性结合AMOT/p130进而对AMOT/p130进行泛素化降解从而调节Hippo pathway。这些现象表明Nedd4-like ubiquitin ligases是Hippo pathway的潜在调节因子。