目的:急性肺损伤（acute lung injury,ALI）是临床常见的呼吸系统危重症,尚缺乏遏制病情发生和进展的有效药物,机械通气是目前唯一有效的治疗措施,医疗耗资巨大,病死率可高达41%。肺泡毛细血管弥漫性损伤、血管通透性增加是ALI肺水肿形成的基本病理基础。因此研究血管通透性升高的机理将为临床治疗提供理论依据。正常血管内皮细胞屏障由内皮细胞多糖包被（glycocalyx,GCX）与细胞间连接蛋白共同组成,课题组的前期研究发现脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的ALI中内皮细胞GCX损伤与肺水肿密切相关,然而间隙紧密连接结构和功能的正常也是维持正常肺通透性重要因素,基于前期研究,推测LPS-ALI中不但有内皮细胞GCX的损伤,紧密连接的损伤在ALI中也发挥重要的作用。本研究拟观察LPS致ALI小鼠模型与内皮细胞损伤模型中GCX与紧密连接的损伤及可能的损伤机理。方法:研究分为三部分:首先利用C57BL/6小鼠ALI模型,通过HE染色、FITC-白蛋白法测定肺毛细血管通透性变化、Western blot检测紧密连接蛋白的表达、免疫荧光检测多糖包被侧链HS和紧密连接蛋白表达水平,明确LPS-ALI中GCX和紧密连接蛋白的变化;其次,利用小鼠和HUVECs的ALI模型通过外源添加HPA（重组HPA-Ⅲ）、NAH（HPA抑制剂）,通过HE观察肺组织病理学改变、FITC-白蛋白法测定肺毛细血管通透性变化、免疫荧光检测多糖包被HS和紧密连接的表达,明确多糖包被HS以及紧密连接蛋白损伤的可能机理。最后探讨中药甜菜苷对LPS-ALI的保护性作用以及可能的机理,为ALI的治疗提供理论基础。结果:首先,肺组织病理的结果表明LPS可导致肺组织炎性细胞浸润增多、肺泡水肿、肺泡间隔增厚。免疫荧光显示LPS导致血管内皮的FITC-白蛋白的渗出,HS和紧密连接蛋白的表达明显低于对照组。第二部分结果表明LPS诱导的ALI中HPA含量较对照组明显增加;NAH+HPA组比单纯HPA组小鼠肺损伤程度减轻、FITC-白蛋白渗出减少、HS和紧密连接蛋白表达增加;NAH+LPS组比LPS组肺损伤程度轻、FITC-白蛋白渗出减少、HS和紧密连接蛋白表达增加。最后甜菜苷预处理可以减轻LPS诱导的小鼠ALI中的病理损伤、与对照组相比W/D明显减轻、内皮多糖包被HS和紧密连接蛋白损伤减轻;Western blot结果显示甜菜苷预处理可抑制NF-κB通路激活和炎性因子释放。结论:LPS致肺损伤过程中内皮细胞多糖包被HS与内皮细胞紧密连接均有损伤,共同参与肺通透性的增加;LPS诱导的内皮细胞HPA增加与多糖包被HS的破坏有关,也与紧密连接损伤有潜在关系;外源添加HPA抑制剂NAH可以改善肺损伤,减轻多糖包被HS的破坏,同时也使紧密连接的破坏减轻,进而使肺损伤与肺水肿减轻;甜菜苷可减轻LPS致肺损伤的炎症反应,具有保护内皮细胞多糖包被和紧密连接的损伤、改善LPS引起的肺损伤的作用。