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本试验对北京油鸡小肠上皮干细胞和脑神经干细胞的分离、培养及生物学特性进行了初步的探究,得出如下结果：1.以18日龄北京油鸡肠组织为实验材料,经0.1g/L中性蛋白酶I和300U/mL胶原酶XI联合消化,体外分离得到鸡小肠上皮干细胞(intestinal epithelial cells,IECs),采用DMEM/F-12基础培养基+5%FBS+2mM L-谷氨酰胺+10ng/ml EGF+10ng/ml bFGF+丙酮酸钠的培养体系对北京油鸡肠上皮干细胞进行体外分离培养时,获得的效果最佳。鸡IECs呈鹅卵石或多角形铺路石样排列,单层贴壁生长。2.不同代次鸡小肠上皮干细胞生长曲线均呈典型的“S”形,符合细胞体外生长的一般规律,均经历了潜伏期、对数生长期、平台期。并且随传代次数增加,细胞分裂及增殖能力逐渐减弱。3.对鸡小肠上皮干细胞进行冻存与复苏实验,共计冻存24支,且冻存前和复苏后的细胞活率都随着传代代次的增加而呈下降趋势,其主要原因可能是细胞在冷冻和复苏过程中遭受化学及物理机械损伤所致,但是细胞活率均维持在90%以上。4.采用RT-PCR和免疫荧光对体外培养的北京油鸡小肠上皮干细胞进行鉴定,RT-PCR检测结果表明,不同代次的细胞均为Musashil, Bmil, Hesl,CD29阳性。免疫荧光显示鸡小肠上皮干细胞呈Musashil, DCAMKL1, LGR5, Bmil, Hesl阳性。5.采用机械吹打法分离10日龄鸡脑神经干细胞neural stem cells,NSCs),在体外培养至第7代,呈细胞球状悬浮生长。在培养过程中,将会有部分细胞发生自然分化现象,呈贴壁生长状态并出现短而小的突起等神经细胞特化结构,但大部分细胞仍呈细胞球状悬浮生长,可通过更换培养瓶的方法,以去除贴壁生长的自然分化细胞。6.采用RT-PCR和免疫荧光对体外培养鸡脑神经干细胞进行表面标记检测。结果表明NSCs呈Nestin, Hes1, Musashi1和Vimentin阳性。7.将鸡脑神经干细胞在适宜的诱导条件下向神经元细胞、星型胶质细胞和少突胶质细胞三个方向进行诱导,通过RT-PCR和免疫荧光两种方法鉴定所诱导的细胞为目的细胞,进一步验证了鸡脑神经干细胞的多向分化潜能。