合募配穴针刺后胃溃疡大鼠胃蛋白质组的纳升级二维液相色谱分析

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目的:通过对应激性胃溃疡(SU)大鼠胃经下合穴及募穴进行针刺,并借助纳升级二维液相色谱(Nano-2DLC)技术深入研究针刺后的胃组织差异蛋白谱峰,以此揭示合募配穴法治疗应激性胃溃疡等胃腑疾病的特异性效应规律和作用机制,为腧穴配伍和腧穴协同效应研究提供思路,并初步确立针灸效应物质基础研究的新模式和新技术。方法:75只Wistar大鼠随机分为5组:空白对照组、应激性胃溃疡模型组、下合穴组、募穴组、合募配穴组(后三组为针刺治疗组)。胃溃疡大鼠模型采用捆绑加水浸应激的方法进行模型复制。各组大鼠依照分组选取穴位,合募配穴组取“足三里”穴加“中脘”穴针刺;“下合穴组”取“足三里”穴针刺;“募穴组”取“中脘”穴针刺;应激性胃溃疡模型组每日只捆绑不针刺;然后将以上四组大鼠剑突以下浸入到恒温(20℃)水浴中;空白对照组正常喂养,不予处理。各组大鼠胃组织利用纳升级二维液相色谱技术进行不同组间的差异蛋白谱峰分析。结果:1肉眼观察模型组与空白组相比有数量不等、大小不一的溃疡灶出现;针刺治疗三组与模型组相比,前者可见胃粘膜损伤程度减轻。针刺治疗三组间比较:下合穴组与募穴组相比,大鼠胃体部均可见若干咖啡色的出血点,差异不明显;合募配穴组与下合穴组和募穴组相比,大鼠胃组织虽也有出血点,但直径较小,数量较少,且粘膜较肥厚润滑。2统计应激性胃溃疡模型组、下合穴组、募穴组、合募配穴组溃疡指数,模型组与下合穴组、募穴组比较有显著性差异,模型组与合募配穴组比较有非常显著性差异,下合穴组与募穴组比较有显著性差异,下合穴组和募穴组与合募配穴组比较有显著性差异。3观察空白组与模型组和治疗组色谱图,在保留时间27min~32min时,后二者比前者多出5个色谱峰,其中有5个色谱峰的保留时间基本一致;模型组与募穴组相比,5个色谱峰的面积对应缩小;募穴组与下合穴组相比,5个色谱峰的峰面积对应缩小;下合穴与合募配穴组相比,5个色谱峰的峰面积对应缩小。结论:1单纯针刺足三里穴或中脘穴对胃溃疡模型的治疗能够起到一定的作用,并且单纯针刺足三里穴比单纯针刺中脘穴对胃溃疡模型的治疗作用强,但单纯针刺二穴远不及合募配穴组疗效明显。2应激性胃溃疡大鼠胃组织蛋白酶解液中具有5种特异性多肽。3针刺对应激性胃溃疡的治疗机制可能与5种多肽含量的减小有关。
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