目的： 建立小鼠肠道菌群失调模型,使用自制苹果酵素对模型小鼠进行干预,从微生态学角度研究自制苹果酵素对肠道菌群失调小鼠肠道微生态的恢复重建作用,为治疗肠道菌群失调症找到安全、高效的微生态制剂提供理论依据。方法： 1、50只清洁级昆明种小鼠,8周龄,体重33.28±3.13g,雌雄各半,分笼喂养,清洁环境饲养。随机抽取10只小鼠做为正常对照组,其余40只建立动物模型。2、采用盐酸林可霉素致小鼠抗生素相关性腹泻,随机选取10只建模小鼠进行检测。待菌群失调模型建立后,随机将30只小鼠分为模型组,实验组,微生态制剂组,每组10只。3、使用自制苹果酵素进行干预后,无菌收集各组小鼠肠道回肠部和结肠部中的粪便,提取粪便总DNA,采用PCR-DGGE进行检测,通过条带的灰度值进行比较。4、采用聚类分析、相似性分析和多样性分析统计方法进行评价。结果： 1、建模小鼠腹泻症状逐渐加重,粪便稀,不成形,呈黄色水样;同时出现不同程度的精神萎靡,食量下降,活动迟缓,畏寒扎堆;被毛无光泽。平均体重由造模第1d的最高体重35.69±1.32g降到造模第7d的30.52±0.72g,与正常对照组小鼠相比,差异有统计学意义(R<0.01)。建模小鼠回肠和结肠粪便样本细菌16S r DNA的PCR-DGGE图谱分析显示泳道中条带数量及亮度较正常对照组明显减少,肠道菌群多样性指数降低,较相应对照组相比,差异有统计学意义(R<0.05)。2、各处理因素干预7d后,微生态制剂组和实验组小鼠行为逐渐活跃,精神状况良好,腹泻症状减轻。粪便性状转变为黄色颗粒状,质地较硬,进食量增加。且比模型组恢复的快。实验组小鼠体重恢复最快,达到35.35±2.56g,实验组小鼠体重与治疗前(R<0.01)和模型组相比(R<0.05),差异有统计学意义。而与正常对照组(R>0.05)和微生态制剂组相比(R>0.05),差异无统计学意义。3、正常对照组小鼠肠道回肠和结肠部菌群DGGE显示,泳道中有大量条带存在,对于同一部位样本,泳道中条带的位置和亮度无明显差异。不同部位样本间条带的数量、位置和亮度有明显差异。正常对照组结肠部菌群多样性高于回肠部,差异有统计学意义(R<0.05)。4、不同处理因素对小鼠肠道回肠和结肠部菌群影响的DGGE图谱显示,微生态制剂组和实验组条带数均比模型组多。各组与正常对照组DGGE图谱中出现一些共性条带,同时各组均出现差异性条带,且亮度也有所不同。相似性分析和聚类分析表现为实验组所对应的泳道与正常对照组相似性最高。微生态制剂组、实验组和模型组小鼠回肠和结肠部菌群多样性指数低于正常对照组,差异有统计学意义(R<0.05)。微生态制剂组和实验组多样性指数均大于模型组,差异有统计学意义(R<0.05)。实验组略优于微生态制剂组,但差异无统计学意义。结论： 通过建立肠道菌群失调小鼠模型,采用PCR-DGGE方法证实,自制苹果酵素对肠道菌群失调小鼠肠道微生态有恢复重建的作用。