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目的 1．改良Nash’s法对原代培养的嗅神经鞘细胞（olfactory ensheathing cells，OECs）的纯化效果。 2．移植的OECs对大鼠脊髓半横断损伤的治疗作用。 方法 1．采用改良Nash’s法原代培养、纯化OECs，8-10天后在相差显微镜下观察培养细胞的形态，并通过免疫组织化学方法应用P75抗体对OECs进行鉴定及纯度计算。 2．制造成年Wistar大鼠T10脊髓左半侧横断损伤模型后，将动物分为治疗组和对照组。治疗组：在损伤后立即通过立体定向显微注射法，将OECs移植于损伤处；对照组：通过同样的方法注射DF-10S培养液。移植后8周，（1）应用改良Tarlov法对动物行运动学功能评分，并对评分结果行秩和u检验，以判定实验动物的运动功能恢复情况；（2）应用辣根过氧化物酶（HRP）顺行示踪技术，观察再生轴突在脊髓内的生长情况；（3）应用透射电镜技术，观察再生轴突的数量、髓鞘的完整性及移植OECs的分化情况；（4）应用P75免疫组织化学染色观察OECs移植后的存活及分布情况；（5）应用HE染色方法，观察动物脊髓的损伤程度。 结果 1.8～10天后，培养细胞主要有三种：（1）长梭形双极细胞；（2）圆形细胞和（3）单／多极细胞。纯化细胞以单／多极细胞为主，该类细胞有一个长突起，长突起末端可见分支或囊泡状结构，胞体呈圆或椭圆形，周围可见光晕，立体感强，且可见细胞分裂相，偶见双极和圆形细胞；细胞胞膜P75标记阳性，纯度为92％； 2.移植后8周，（l）治疗组与对照组的运动功能秩和u检验，u二2.07，P<0.05，有显著性差异;（2）治疗组再生轴突均不同程度的进入、穿过胶质瘫痕，到达损伤远侧端;对照组再生轴突无法穿过胶质瘫痕，在胶质瘫痕区弯曲、回折;（3）电镜观察显示，治疗组损伤区轴突数量较多，再生轴突髓鞘完整，结构致密，可观察到雪旺氏细胞样、星形胶质细胞样OECs包绕轴突髓鞘;对照组动物损伤区轴突数量较少，可见有少突胶质细胞包绕轴突髓鞘;（4）治疗组在脊髓损伤处有细胞阳性染色，排列紧密，与宿主脊髓整合良好，对照组无细胞阳性染色;（5） HE染色可见在脊髓损伤区正常结构完全破坏，白质、灰质界限消失，被大量胶质细胞填充或有空洞形成，形成的胶质瘫痕形状不规则，瘫痕两端灰、白质分明，脊髓结构完整。结论 1.在Nash’S法基础上进行改良，应用细胞贴壁率不同的原理分离、纯化OECs，同样达到纯化目的，并且缩短培养周期，避免应用其他生物化学试剂，使OECs的生物学特性得以保留; 2.移植的OECs可促进大鼠运动功能的恢复和脊髓轴突的再生、髓鞘的重塑。