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本试验旨在从生长猪回肠、结肠、盲肠中分离共生及中间型菌种,进行体外生理生化试验的研究,选择氮利用高的菌种-嗜淀粉乳杆菌(Lactobacillus amylovorus,LA)和粪肠球菌(Enterococcus faecalis,EF),研究嗜淀粉乳杆菌和粪肠球菌对断奶仔猪的生产性能、免疫功能、抗氧化功能及肠道微生物区系的影响。本论文包括以下两部分研究内容:研究内容一:试验选取60 d健康生长猪一头,屠宰后无菌收集回肠、结肠、盲肠内容物进行梯度稀释。经37oC厌氧培养24 h后,在显微镜下观察形态,根据不同形态进行标记,提取菌种DNA,进行16 sRNA测序。得到嗜淀粉乳杆菌(Lactobacillus amylovorus,LA)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis,EF)和大肠杆菌(Escherichia coli)。对4种微生物进行体外生理生化试验,试验结果发现嗜淀粉乳杆菌(LA)和粪肠球菌(EF)具有耐酸、耐高温、耐高铜、抑菌特性,同时两种益生菌均具有降低脱羧酶的活性。研究内容二:基于研究内容一的结果,进一步研究LA和EF在断奶仔猪上的应用效果。试验选取胎次相近的健康三元杂交去势28日龄断奶仔猪((荣昌猪)×长×大)40头,按试验目的随机分为4个处理,每个处理10个重复,每个重复1头猪,单栏饲养。试验采用双因素试验设计,分为4个处理:对照(CON)组;嗜淀粉乳杆菌(LA)组(1?1010 CFU,每天3次);粪肠球菌(EF)组(1?1010CFU,每天3次);嗜淀粉乳杆菌+粪肠球菌(LA+EF)组(各1?1010 CFU,每天3次)。试验结果表明:口服嗜淀粉乳杆菌和粪肠球菌后,显著提高了断奶仔猪末重、平均日采食量、平均日增重和饲料转化率(P<0.05);口服嗜淀粉乳杆菌显著提高了胸腺指数、胰脏指数、脾脏指数、淋巴结指数和空肠长度指数(P<0.05);断奶仔猪口服嗜淀粉乳杆菌和粪肠球菌后,显著提高了T-SOD、GSH-PX的活力(P<0.05),显著降低了MDA的活力(P>0.05);嗜淀粉乳杆菌和粪肠球菌具有显著降低仔猪尿的pH的作用(P<0.05)。粪肠球菌和嗜淀粉乳杆菌在提高机体免疫功能方面作用显著,显著提高了β-defensin-2、TLR4的表达(P<0.05),显著降低了HSP90的表达(P<0.05);嗜淀粉乳杆菌和粪肠球菌对肠道微生物脱羧酶的影响上互作效应显著(P<0.05),显著降低了结肠微生物中赖氨酸脱羧酶、蛋氨酸脱羧酶、苏氨酸脱羧酶、色氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶和组氨酸脱羧酶的活性(P<0.05)。两种益生菌没有改变结肠内的优势菌群组成,但提高了盲肠微生物的相对丰度。嗜淀粉乳杆菌降低了盲肠中肠杆菌、梭状芽孢杆菌的相对丰度,提高了乳酸菌、韦荣球菌、毛螺科菌属的相对丰度。综上所述,嗜淀粉乳杆菌和粪肠球菌具有改善动物生产性能、提高机体免疫力、保护肝脏的作用,在不改变肠道优势菌群组成的情况下,提高了盲肠中部分有益菌的丰度,降低了一些有害菌的丰度,起到了维持肠道微生态平衡的作用。因此,可以考虑作为添加剂在养猪生产中应用。同时我们发现,两种益生菌混合使用效果与嗜淀粉乳杆菌单独添加的效果相当。因此,在生产中我们可以选择单独添加嗜淀粉乳杆菌,既达到了健康养殖的目的,同时节约了成本。