毛细管电泳分析条件优化方法研究

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毛细管电泳是一种高效、快速和高灵敏的分离分析技术,已在药学和生命科学等领域得到广泛应用。由于影响毛细管电泳分离的因素较多且各因素间存在着复杂的交互作用,因而除需选择合适的分离模式外,还需综合考察毛细管柱、缓冲液体系、温度、电压和进样条件等诸多因素,这使得毛细管电泳仪器分析条件的选择较为困难。尤其在复杂样品的分析中,往往难以建立适用的CE分析方法。因此,优选CE分析条件已成为构建CE分析方法的重要环节。显然,研究CE分析条件优化方法对于药物分析学科和CE分析技术的发展具有重要的科学意义及实际应用价值。 本文针对复杂样品分析条件选择难题,研究用试验设计法、遗传算法和粒子群优化算法等构建毛细管电泳分析条件优化方法。其主要研究内容包括以下几个方面: (1) 以黄芩药材为分析对象,采用试验设计法优化毛细管电泳分析条件。用中心组成试验设计法考察硼砂浓度、NaH2PO4浓度、SDS浓度、乙腈含量和异丙醇含量等因素对分离效果的影响,以谱图中所有峰的总分离度为评价指标,确定最优分析条件。在该分析条件下,分析测试了18个不同来源的黄芩样品,黄芩苷等成分在14min内得到较好分离,检测出8个共有峰,并同时测定了黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素等3种指标性成分含量,结果令人满意。 (2) 以尿样核苷类成分为分析对象,用中心组成试验设计法系统考察硼砂浓度、SDS浓度、pH值和运行电压等因素对毛细管电泳分离效果的影响,以色谱指数方程(CEF)为指标对分离情况进行评价,并建立CEF值与各因素间的关系模型,运用遗传算法对所建关系模型进行全局寻优,获取最优分析条件。实验验证结果表明,在该最优分析条件下各核苷类成分在12min内得到较好分离。 (3) 以丹参药材为分析对象,采用正交试验设计法筛选出硼砂浓度、NaH2PO4浓度、乙腈含量和运行电压等主要影响因素,进而用中心组成试验设计法对这些主要因素进行系统考察。以改良色谱指数方程(MCEF)为指标对毛细管电泳分离情况进行评价,建立MCEF值与各主要因素间的关系模型,并运用粒子群优化算法对该模型进行全局寻优,获取最优分析条件。实验验证结果表明,所获最优
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