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目的 胃癌是危害人类健康的主要恶性肿瘤之一,其发病原因尚未完全明了。近年来细胞凋亡与肿瘤发生的关系愈来愈受到重视。Caspase-3(cpp32,yama,apopain)是Caspase家族的重要成员,它作为凋亡效应期(execution phase)的中心分子,参与细胞的生理及病理死亡过程,在凋亡研究中倍受关注。研究表明Caspase-3在许多正常人体组织及肿瘤组织中有表达,但其表达水平与肿瘤生物学行为关系的研究尚少。Bcl-X_L是近年发现的Bcl-2家族中的一员,它具有抑制Caspase-3作用的功能。另有研究表明Cox-2在癌组织中过度表达可拮抗刺激剂诱导的细胞凋亡,增强Bcl-2蛋白的表达。本研究采用免疫组织化学方法观察Caspase-3、Bcl-X_L及Cox-2在胃癌和癌旁组织中的表达,并探讨三者与胃癌生物学行为及临床病理行为的关系。 方法 1.研究对象:中国医科大学第二临床学院2000~2003年存档的54例胃癌病人的癌及癌旁组织石蜡切片标本。 2.主要试剂及仪器:抗Caspase-3、Bcl-X_L、Cox-2单克隆抗体购自北京中山公司,免疫组化S-ABC试剂盒购自武汉博士德公司。免疫组化配套仪器及图像分析系统由中国医科大学附属二院病理科提供。 3.免疫组化步骤:按照博士德公司S-ABC试剂说明书进行,石蜡组织切片厚4μm。抗Caspase-3、Bcl-X_L、Cox-2单克隆抗体稀释浓度为1:200,1:100,1:50。 4.免疫组化结果判定:观察5个不连续的高倍视野。以胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性细胞,按阳性细胞数所占比例分为:阳性细胞数<5%为表达阴性组,阳性细胞数≥5%为表达阳性组。 5 统计分析:采用SPSS11.5分析软件进行统计学处理,应用χ~2检验分析Caspase-3、Bcl-X_L、Cox-2表达与临床病理行为的关系,同时分析三者表达的相关性(P<0.05为差异显著性标准)。结果 (1)胃癌组织中Caspase一3、Bel2%、53 .7%、62.9%。(2)Caspase一3一XL及Cox一2表达的阳性率分别为22.表达在不同组织学分级、淋巴结转移组 ,。r--,、,,二、‘:、,。刃朋r叫书亚省左并沙=U.022,P=0.010,P== 0.007)。Bcl一xL表达在不同组织学分级、L川订en分型、淋巴结转移组与非转移组、TNM分期间有显著差异(P二0.033,P=0.005,P=0.016,P二0.加9)。Cox一2表达在不同组织学分级、淋巴结转移组与非转移组间、在不同TNM分期间有显著差异(P二0.013,P二0.019,P二0.008)。(3)Caspase一3和Bel-XL表达呈负相关(r二一0.308,P二0.024),Bel一XL和Cox一2表达呈正相关(:=0.料2,p=0.oox),Caspase一3与Cox一2表达无明显相关性(r二_on气lp=0 71久、_结论 (1)人胃癌组织中Caspase高。(2)人胃癌组织中Caspase级、La~n分型、淋巴结转移、一3表达较低,而Bd一XL及Cox一2表达较一3、Bcl一X:、Cox一2的表达与胃癌组织学分翎M分期密切相关,对判断胃癌预后可能具有重要价值。(3从胃癌组织中Caspase一3与Bd一XL表达呈负相关,而Bcl一XL与Cox一2表达呈正相关。