本研究小组在前期的工作中利用抑制性差减杂交(Suppressionsubtractive hybridization，SSH)的方法，得到了许多与日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)天然免疫相关的基因，本论文选取了其中的三个进行深入的研究。 MjKPI-1(M． japonicus Kunitz-type protease inhibitor-1)是在微生物(细菌和酵母)胁迫后表达上调的一个基因，编码的蛋白由一个信号肽和一个Kunitz结构域组成。通过筛选日本囊对虾cDNA噬菌体展示库，发现由毕赤酵母系统表达的重组蛋白MjKPI-1能够与内源的胰蛋白酶相互作用，并通过体外的胰蛋白酶抑制实验得以证实。 Mj-DWD(M．japonicus’double-WAP domains)基因是从抗病虾血细胞差减文库中克隆到的，编码的蛋白含有一个整合素结合位点KGD(Lys-Gly-Asp)和两个WAP(whey acidic protein)结构域。通过实时定量PCR发现，在新制备的抗病虾中Mj-DWB基因的表达保持在一个较高的水平；另外在WSSV感染早期，正常虾中Mj-DWD基因表达也明显上调。进一步研究发现，毕赤酵母系统表达的重组蛋白Mj-DWD，能够特异性地抑制枯草芽孢杆菌产生的蛋白酶活性。 结果表明，MjKPI-1和Mj-DWD都属于丝氨酸蛋白酶抑制剂，我们推测它们是通过丝氨酸蛋白酶抑制活性在对虾的天然免疫中起作用。 Mj-TCTP(M． japonicus translationally controlled tumor protein)基因也是从抗病虾血细胞差减文库中克隆到的。为了研究 Mj-TCTP基因的表达调控机制，我们克隆了它的启动子，并在昆虫细胞中进行了活性验证。同时我们还发现 Mj-TCTP mRNA和鼠的TCTP mRNA一样会形成高度稳定的二级结构。有趣的是鼠的TCTP mRNA形成的二级结构已被证实能够结合并激活抗病毒过程中一个重要的激酶 PKR(double-stranded RNA-dependent proteinkinase)。另外，我们还利用原核表达的rMj—TCTP蛋白筛选了 WSSV全基因组的噬菌体展示库。这些结果将有助于我们更好地理解 TCTP在对虾抵抗病毒感染过程中的作用。