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目的:近来多数研究将组织工程材料与干细胞或因子复合来改善动物脊髓损伤模型损伤处的微环境,以增加作用时长、提高恢复效果与预后。本研究旨在探究:1.制作音猬因子(SHH)-聚多巴胺(Polydopamine)-纤维蛋白(Fribin)支架并探究其缓释效果与特性。2.构建SD大鼠脊髓损伤模型,移植PD-SHH-Fibrin支架,观察相关脊髓生长蛋白阳性率,评价其修复效果。方法:1.采用真空冷冻干燥机制作Fibrin支架,制作完成后置入配好的PH=8.5的盐酸多巴胺溶液中浸泡24h进行交联,再将交联后的支架置入SHH溶液中吸附交联24h,制作完成后使用ELISA试剂盒测其缓释性能。2.取60只8周龄雌性SD大鼠,建立脊髓损伤模型,随机分4组处理:A组不植入任何材料,B组损伤处植入Fibrin支架,C组损伤处植入PD-Fibrin支架,D组损伤处植入PD-SHH-Fibrin支架,术后12周内进行下肢运动功能BBB评分;术后12周取脊髓损伤处组织,分别进行组织学观察(苏木精-伊红与免疫组织化学)与Weston blot检测。3.取40只8周龄雌性SD大鼠,建立脊髓损伤模型,随机分4组处理:A组不植入任何材料,B组损伤处植入Fibrin支架,C组损伤处植入PD-Fibrin支架,D组损伤处植入PD-SHH-Fibrin支架,术后6周行二次手术,于横断段下1cm处打入荧光金,4周后取出整个脊髓,采用连续冰冻切片在镜下观察荧光金(Fluoro-Gold,FG)标记阳性细胞数量。4.取40只8周龄雌性SD大鼠,在建立损伤模型前每只大鼠行电生理观察下肢电生理情况,包括体感诱发电位(SEP)与动作诱发电位(MEP)。随后大鼠建立脊髓损伤模型,随机分4组处理:A组不植入任何材料,B组损伤处植入Fibrin支架,C组损伤处植入PD-Fibrin支架,D组损伤处植入PD-SHH-Fibrin支架,术后8周通过SEP和MEP的检测,观察大鼠下肢运动与感觉的恢复情况。结果:1.在16d观察期内,在早期5 d,该支架SHH释放速度缓慢,且在第1天支架并未表现出因子突释现象,随后的7 d,支架内SHH呈现快速释放,在最后的4d,支架内SHH释放完全,且最后1 d支架崩解并表现出SHH释放速度加快。2.从术后2周开始,各组大鼠下肢运动功能开始恢复,D组术后5-12周的BBB评分高于其他3组(P<0.05),D组下肢运动功能恢复最好;3.苏木精-伊红染色显示,C、D组可见新生的神经纤维组织,但C组新生神经纤维组织的量与密度低于D组;4.免疫组织化学染色显示,D组损伤处可以观察到大量线性排列的新生神经纤维,髓磷脂碱性蛋白(MBP)、生长相关蛋白(GAP43)和神经丝蛋白(NF200)阳性率高于其他3组,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性率低于其他3组;5.Western blot检测显示,D组MBP、GAP43、NF200高于其他3组(P<0.05),GFAP表达低于其他3组(P<0.05);6.荧光金逆行示踪结果示PD-SHH-Fibrin支架组损伤区有较多阳性神经纤维通过,荧光阳性细胞数量明显优于其它三组。7.电生理结果提示:PD-SHH-Fibrin支架组大鼠体感诱发电位及运动诱发电位的潜伏期、波幅明显优于其它三组。结论:音猬因子-聚多巴胺-纤维蛋白支架(PD-SHH-Fibrin)表现出良好的生物相容性并具有持续稳定的缓释效果。该复合支架对大鼠脊髓损伤修复有明显促进作用。