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药物分析既是药学科学的主要组成部分,也是分析化学的重要研究领域。随着国民经济的发展、科学技术的进步以及人民生活水平的提高,人们对药物分析也提出了更高的要求。这不仅需要更好的利用现有的分析方法和联用技术,更需要研究和开发新的检测手段和方法。因此,建立更加灵敏、准确、简便、快速的药物分析新方法、新技术具有重要意义。
药物分子与小分子试剂相互作用会导致体系的紫外.可见吸收光谱、荧光光谱和共振光散射光谱特性发生变化。其中共振光散射(Resonance light scattering,RLS)是20世纪90年代兴起的一种新的定量分析技术。近年来,它在考察生色团在生物大分子上的聚集作用时显示出了较高的灵敏度,被广泛应用于核酸、蛋白质等大分子的研究;另外,基于一些小分子之间在一定条件下的相互作用,共振光散射也被应用于无机离子、表面活性剂等的测定。RLS技术在上述等方面的系统研究和广泛应用为其在药物分析领域的发展创造了有利条件。
正是以此为出发点,我们在前人工作的基础上,将共振光散射技术用于药物的分析,利用在一定条件下,某些药物分子与带相反电荷的染料或其它探针依靠静电引力、疏水作用力等发生离子缔合反应,引起体系RLS光谱增强这一原理,建立了测定消旋山莨菪碱、三磷酸腺苷二钠、马来酸氯苯那敏、盐酸丙米嗪和盐酸二氧丙嗪的新方法,研究了它们与染料或无机聚阴离子相互作用的光谱特征、反应的影响因素和最佳条件等,进一步拓展了RLS技术的应用领域。本论文共分为六章。
第一章概述了光散射现象及其应用:介绍了共振光散射技术的原理、优点;详细综述了近年来共振光散射及其新技术在药物分析中的应用;展望了RLS技术的发展前景。
第二章根据在弱酸性介质中,曙红Y与消旋山莨菪碱反应形成离子缔合物,使共振光散射信号显著增强,建立了一种测定消旋山莨菪碱的新方法。在最大散射波长364nm处,RLS的增强程度与消旋山莨菪碱的浓度在一定范围内呈正比,用于片剂中消旋山莨菪碱含量的测定,分析结果与中国药典提供的方法吻合良好。
第三章基于三磷酸腺苷二钠(ATP)与吖啶黄在弱碱性介质中相互作用形成最大散射峰位于325 nm处的离子缔合物的现象,建立了测定ATP的新方法,其线性范围为0.80-20.0μg/mL。将方法用于市售三磷酸腺苷二钠片剂和针剂含量的快速测定,结果与药典法对照无显著性差异。
第四章依据荧光桃红在pH 4.3的HAc-NaAc缓冲溶液中与马来酸氯苯那敏相互作用形成离子缔合物,导致体系RLS强度显著增强这一现象,建立了马来酸氯苯那敏测定的新方法。用于市售药物制剂中马来酸氯苯那敏含量的快速测定,回收率在99.7%-103.1%之间。
第五章根据在pH 4.1的HAc-NaAc介质中,微量的盐酸丙米嗪与曙红Y共存时使曙红Y溶液的吸收光谱、荧光光谱、共振光散射光谱发生变化,建立了测定盐酸丙米嗪的新方法。在最大散射峰364 nm处,测得盐酸丙米嗪的线性范围为0.025-2.5μg/mL,检测限为5.32 ng/mL,已成功用于药物中盐酸丙米嗪含量的测定。
第六章以钨酸根聚阴离子为共振光散射探针,建立了在磷酸介质中测定盐酸二氧丙嗪的RLS方法,最大散射峰位于364 nm处,检测限可达2.14 ng/mL。方法已成功用于药物制剂中盐酸二氧丙嗪含量的测定。