老年痴呆是一种以记忆损伤为主的多种认知功能障碍的神经系统疾病。阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是一种最常见的老年痴呆疾病类型。AD的主要病理特征为β样淀粉蛋白沉积，纤维缠结，基底核胆碱能神经元缺失，海马及皮层神经元广泛丢失及突触改变。最近的研究指出，活化的小胶质细胞的出现是AD的另一病理特征。小胶质细胞是中枢神经系统的免疫细胞，作为常驻的免疫和吞噬细胞，在中枢神经系统发挥重要作用。在中枢神经系统的炎症进程中，多种因素可以诱发小胶质细胞的活化，活化的小胶质细胞可释放包括一氧化氮（NO）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）在内的大量的神经毒性因子。研究表明，抑制小胶质细胞的活化有可能成为防治AD的一个重要策略。本论文以NO释放为指标，拟从部分中草药单体成分中筛选对脂多糖（LPS）活化的N9细胞有抑制作用的成分，并对有效成分探讨其作用机制。首先，我们应用Griess法，筛选了16种中草药单体成分对LPS活化N9细胞NO释放的抑制作用。结果发现，16种单体化合物中，仅Rg1，Re，RT5和白藜芦醇能够显著抑制LPS活化的N9细胞NO的异常增高。并在原代培养的大鼠小胶质细胞上得到进一步的验证。而后，进一步对上述活性成分的分子生物学机制研究进行探讨。结果表明，Rg1，Re、Rd、Rb2、PF₁₁、RT5和白藜芦醇7种化合物对于LPS激活小胶质细胞TNF-α的增高均具有显著的抑制作用；但仅有原人参三醇型皂苷Rg1，Re，奥克梯隆型皂苷RT5及葡萄籽提取物白藜芦醇以不同剂量对LPS激活小胶质细胞NO释放的增多具有抑制作用，而其它化合物却无此作用。应用免疫印迹法，我们对NO相关蛋白诱导型一氧化氮合酶（iNOS）及对于NO和TNF-α具有重要调节作用的核转录因子（NF-κB）相关蛋白iκBα的表达进行了研究。同时对介导活化的小胶质细胞释放神经毒性物质的丝裂原蛋白激酶通路（MAPKs）的相关蛋白p38和ERK的表达作了进一步的研究。结果表明，Rg1，Re，RT5和白藜芦醇能够对LPS激活的小胶质细胞iNOS和降解的iκBα蛋白表达的增加具有明显的抑制作用。同时对p38和ERK的磷酸化表达，也具有明显的的降低作用。Rd，Rb2能够降低ERK的磷酸化表达程度及降解的iκBα蛋白表达的增加，但是对于LPS激活的小胶质细胞iNOS蛋白的表达和磷酸化的p38表达却无抑制作用。值得注意的是PF₁₁能够降低p38和ERK的磷酸化表达程度及降解的iκBα蛋白表达的增加，但是对于LPS激活的小胶质细胞iNOS蛋白的表达无作用。综上所述，我们的结果提示上述化合物通过降低LPS激活的小胶质细胞p38和ERK的磷酸化表达程度及降解的iκBα蛋白和iNOS表达的增加，从而降低抑制NO及TNF-α在内的大量的神经毒性因子的释放，其中p38通路可能是单体成分发挥活性作用的靶点。研究表明，活化的小胶质细胞释放的毒性因子对神经细胞会产生直接毒性，从而诱发神经细胞病变。为探讨上述化合物抑制小胶质细胞活化是否能对神经细胞起到保护作用，我们以Fura-2／AM为细胞内钙离子的荧光指示剂，用荧光分光光度仪检测PC12细胞胞浆内游离钙离子的浓度。就7种化合物对LPS激活小胶质细胞条件培养液引发PC12细胞胞浆内游离钙离子增高的抑制作用进行研究。同时，我们对7种单体化合物对PC12细胞胞浆内静息态钙离子浓度的影响以及活化小胶质细胞条件培养液对PC12细胞细胞成活率的影响也做了进一步研究。结果表明，LPS激活小胶质细胞条件培养液不影响PC12细胞的成活率，但可引起PC12胞浆内钙离子浓度显著增高；7种化合物中Rb2、Rg1，白藜芦醇，本身对PC12细胞胞浆内静息态钙离子浓度有降低作用，而Re、Rd、PF₁₁、RT5不影响静息态钙离子浓度。同时Rg1，Re，RT5和PF₁₁对激活小胶质细胞条件培养液引发PC12细胞胞浆内游离钙离子增高也具有显著的抑制作用。提示7种化合物能够保护由于小胶质细胞活化引起的神经细胞的损伤。综上，本文对中草药成分抑制LPS活化的N9细胞NO和TNF-α释放的作用及其中有效成分作用机制研究表明，7种化合物可抑制LPS活化的N9细胞释放的神经毒性物质；并对活化的小胶质细胞对神经元的损伤具保护作用。