【摘 要】
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本论文旨在研究羊血来源生物活性肽的抗氧化活性,采用酶解法处理羊血红蛋白,综合其水解特性及其抗氧化活性筛选出最适蛋白酶,通过单因素试验及响应面试验研究确定其最佳制备工艺,从清除自由基及还原力角度探究其体外抗氧化能力,建立大鼠Diquat氧化应激模型进行体内抗氧化试验。试验结果表明:1.用E蛋白酶、M蛋白酶、F蛋白酶和N蛋白酶水解羊血红蛋白,以DPPH清除率、羟自由基清除率为评价指标,综合筛选出M蛋白
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本论文旨在研究羊血来源生物活性肽的抗氧化活性,采用酶解法处理羊血红蛋白,综合其水解特性及其抗氧化活性筛选出最适蛋白酶,通过单因素试验及响应面试验研究确定其最佳制备工艺,从清除自由基及还原力角度探究其体外抗氧化能力,建立大鼠Diquat氧化应激模型进行体内抗氧化试验。试验结果表明:1.用E蛋白酶、M蛋白酶、F蛋白酶和N蛋白酶水解羊血红蛋白,以DPPH清除率、羟自由基清除率为评价指标,综合筛选出M蛋白酶为最佳水解用酶。通过单因素和响应面试验设计,获得制备羊血来源抗氧化肽的最优工艺条件:水解温度49℃、底物浓度7%、水解时间3h、水解PH7.0和酶添加量5%,在该条件下,所得抗氧化肽的DPPH清除率高达98.15%。2.采用优化后的条件制备羊血来源抗氧化肽,冻干成粉用蒸馏水分别配制不同浓度的溶液,通过测定其还原力、OH自由基清除率、DPPH自由基清除率和ABTS自由基清除力计算IC50值以评价其体外抗氧化活性,结果表明羊血来源抗氧化肽对DPPH自由基的IC50清除率为2.59 mg/ml,对羟自由基的IC50清除率为6.42 mg/ml,对ABTS自由基的IC50清除率为0.84 mg/ml。3.选取18只Wistar大鼠,采用Diquate建立氧化应激模型,确定800mg/kg BW为缓解氧化应激剂量,饲喂羊血来源抗氧化肽,其中各组大鼠的采食量、体重和脏器重无显著性差异（P>0.05）;饲养14d时血中MDA指标降低且各组差异显著（P<0.05）,SOD及T-AOC指标升高但各组差异不显著（P>0.05）;攻毒后,羊血来源抗氧化肽可缓解大鼠的氧化应激状态,各脏器抗氧化指标呈现出不同的抗氧化规律且对大鼠肝脏、肾脏和回肠Nrf2-ARE信号通路及NF-KB相关m RNA产生一定的影响。
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