论文部分内容阅读
本试验研究了异亮氨酸对生长中期草鱼肉质以及鳃屏障功能的影响,并确定了生长中期草鱼对异亮氨酸的需要量。试验选择平均体重256.8±3.8 g(P>0.05)的健康草鱼540尾,平均分为6个处理,每个处理3个重复,每个重复30尾鱼,饲喂不同水平的异亮氨酸饲粮(3.8,6.6,9.3,12.5,15.2和18.5 g/kg)8周,考察异亮氨酸对鱼肌肉品质和抗氧化能力的影响。生产试验结束后,每个处理选取30尾鱼,进行铜浸泡试验,探索异亮氨酸对草鱼鳃屏障功能的保护作用。本试验结果如下：1.生产试验生产试验结果表明,与对照组(3.8 g/kg饲粮)相比,添加异亮氨酸显著提高了(P<0.05)生长中期草鱼：(1)增重百分比(PWG)、特异性生长率(SGR)、摄食量(FI)、饲料效率(FE)和蛋白沉积率(PER)；(2)肌肉粗蛋白和粗脂肪含量；(3)肌肉剪切力、羟脯氨酸含量和pH值；(4)肌肉抗超氧阴离子能力(ASA)、抗羟自由基能力(a-HR)、谷胱甘肽(GSH)含量、铜锌超氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性；(5)肌肉Cu/Zn-SOD、GPx和谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)的基因表达；(6)肌肉抗氧化相关信号分子包括核因子相关因子2(Nrf2)、雷帕霉素靶蛋白(TOR)、核糖体蛋白激酶1(S6K1)和酪蛋白激酶2(CK2)的基因表达。与此相反,添加异亮氨酸可以显著降低(P<0.05)生长中期草鱼：(1)血氨含量；(2)肌肉水分含量、失水率、组织蛋白酶B和L活性和乳酸含量：(3)肌肉丙二醛(MDA)含量、蛋白羰基(PC)含量以及过氧化氢酶(CAT)活性；(4)肌肉CAT和Kelch样ECH联合蛋白1(Keapl)基因表达。结果说明：异亮氨酸可以提高生长中期草鱼的生产性能和改善草鱼肉质,而肉质的改善可能与肌肉抗氧化能力提高有关,进一步测定肌肉抗氧化相关基因的表达揭示了异亮氨酸提高鱼肌肉抗氧化能力的部分机制。2.铜浸泡浸泡试验4天0.7 mg Cu/L铜浸泡浸泡的试验结果表明,与阳性对照组相比,添加异亮氨酸可以显著提高(P<0.05)铜浸泡后生长中期草鱼鳃：(1)GSH含量、ASA、 a-HR、Cu/Zn-SOD、CAT、GPx、谷胱甘肽还原酶(GR)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性；(2) Cu/Zn-SOD、CAT、GPx. GR)和GST基因表达：(3)紧密连接蛋白claudin-3、claudin-b、claudin-c、occludin, ZO-1%白介素10(IL-10)和转化生长因子p (TGF-p)基因表达；(4)相关信号分子Nrf2、TOR、S6K1和核因子KB抑制蛋白(IκB)基因表达。相反地,添加异亮氨酸可以显著降低(P<0.05)生长中期草鱼鳃：(1)PC和MDA含量；(2)白介素1(IL-1)、白介素8 (118)、claudin-12、Keap1、肿瘤坏死因子a(TNF-a)和核因子κB (NF-κB)基因表达。异亮氨酸对claudin-15基因表达无显著影响(P>0.05)。结果表明：异亮氨酸可通过提高草鱼鳃抗氧化能力和调节紧密连接蛋白表达来改善鳃的屏障功能,而这种有利作用可能与异亮氨酸调节抗氧化和紧密连接相关分子基因表达有关。综上所述,异亮氨酸可以促进生长中期草鱼的生产性能、改善肌肉品质和提高肌肉抗氧化能力,而肉质的改善可能与肌肉抗氧化能力的增强有关；另一方面,异亮氨酸可能通过提高草鱼鳃抗氧化能力和调节紧密连接蛋白来防御铜应激引起的鳃屏障功能的破坏。在本试验条件下,以PWG为标示,用二次曲线回归法确定的生长中期草鱼(253.4-660.8 g)异亮氨酸需要量为12.2 g/kg饲粮或39.3 g/kg蛋白。