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第一部分TLR4基因3’非翻译区11367位点多态性与喘息性疾病发病及临床表型的关系目的:检测TLR4基因3’非翻译区(3’UTR)11367位点的多态性,探讨该多态性与喘息性疾病的易感性、气道分泌物的细胞因子水平、病原学以及临床表型的关系。方法:采用单管双向等位基因特异性扩增技术检测TLR4基因3’UTR 11367位点基因多态性。通过酶联免疫吸附试验( ELISA)法检测喘息组患儿气道分泌物中细胞因子的水平。采用免疫荧光法进行呼吸道合胞病毒检测。结果:TLR4G11367C位点核苷酸存在G/C多态性,表现为GG纯合、GC杂合两种基因型。喘息组和对照组该位点基因型、等位基因分布频率之间均存在显著性差异(P均为0.002)。GG型患儿IL-8水平、病原菌感染阳性率均明显高于GC型。不同基因型的临床表型无显著性差异。结论: TLR4基因3’UTR基因多态性与喘息性疾病易感性相关,可能与气道分泌物中IL-8水平、机体对RSV易感性、气道细菌定植有关。第二部分TLR4基因3’非翻译区11367位点多态性对外周血单核细胞TLR4蛋白表达的影响目的:探讨TLR4基因3’UTR11367位点多态性对RSV感染后外周血单核细胞TLR4蛋白表达的影响。方法:采用健康儿童外周血单核细胞(PBMC)为培养模型,检测RSV刺激前后TLR4蛋白表达变化和IL-8分泌水平进行分析。结果:(1)正常对照组GG、GC两种基因型单核细胞表达TLR4水平无显著性差异(P>0.05)。RSV刺激组较正常对照TLR4表达显著增加(二者荧光强度值分别为5.02±1.56,3.16±0.39,P<0.05),两种基因型单核细胞TLR4表达有显著性意义(P<0.05),其中GG纯合子TLR4表达增加显著高于GC基因型。(2)RSV刺激组较正常对照组外周血PBMC上清IL-8水平显著增加(P<0.05),其中GG纯合子在RSV刺激后IL-8分泌显著高于GC基因型(P=0.001)。结论:TLR4基因3’UTR11367G/C基因多态性对外周血单核细胞培养TLR4蛋白表达产生显著影响,并与RSV刺激后IL-8分泌变化有关。