利用造血干细胞泵出某些荧光染料，如Rho123或Hochest33342，的特性来对其进行分离纯化是目前常用的方法之一。Hochest33342拒染的细胞在流式细胞分析中表现为处于底侧部的一群细胞，因此这群细胞又被称为侧群细胞(side-population)或sp细胞。进一步研究发现，Hochest33342的泵出是由ABC转运蛋白家族的ABCG2基因介导的。ABCG2基因只在早期造血细胞中表达，随细胞的分化，其表达迅速下调。但是ABCG2基因在早期造血细胞中表达的意义目前还不清楚。 在实验中，我们将ABCG2基因导入K562细胞，观察了其对细胞行为的影响，以揭示ABCG2可能的生物学功能。首先，ABCG2转染没有引起细胞形态的改变，说明ABCG2不参与细胞骨架相关的调节。随后我们又研究了ABCG2对细胞的三大基本特性—增殖、分化、凋亡—的影响。台盼蓝计数的结果显示ABCG转染后的细胞增殖速度略低于空载体转染的细胞：经过72h的培养后，pcDNA3.1空载体转染组的细胞数增加了近3倍，而pcDNA3.1／ABCG转染组的细胞数仅增加2.5倍。与此结果相对应的是，细胞周期分析显示，ABCG2转染造成部分细胞被滞留在G0／G1期(GO／G1％：43％versus31％)。以上结果提示ABCG2可能通过调控细胞周期参与了造血干细胞静息状态的维持。 另外，我们还研究了K562细胞的分化特性。结果显示，ABCG2的表达促进了PMA诱导的K562向巨核系的分化。我们推测是因为ABCG2引起了细胞周期的阻滞，所以促进了K562细胞的分化。硕士学位论文中文摘要为了研究ABcGZ泵出底物的作用机制。我们还构建了与绿色荧光蛋白融合表达的ABcGZ真核表达载体，然后转染McF一7细胞，观察了转染细胞对荧光染料HocheS七3 3 3 42的泵出作用。结果显示，PEGFP一cl/ABcGZ转染后，表达绿色荧光的细胞对HocheS七3 3 3 42染料有拒染的特性，而不表达绿色荧光的细胞无此功能。pEGFP一c1空载体转染的对照组虽然也有绿色荧光表达，但无泵出染料的功能。表达ABcGZ的细胞有泵出底物的功能，为我们下一步探讨其可能的作用机制奠定了基础。