温莪术根际促生菌的筛选及其生理特性的研究

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温莪术是我国传统的中药材,近年来大量化肥、农药的使用,使温莪术的种植受到了连作障碍的影响,导致产量降低、品质变劣、繁殖能力变差、有效药用物质含量降低,造成严重的经济损失。微生物肥料具有成本低、肥效高、节约能源、无污染等优点,其对植物生长的促进作用主要表现为:将自然界中植物难以吸收利用的营养物质转化为易于植物吸收收的状态;通过分泌的生长因子促进植物生长和发育;通过竞争、寄生等途径抑制植物病原菌的生长,起到防治植物病虫害的作用。微生物制剂的开发和利用,可减少化肥、农药的使用、消除温莪术连作障碍的影响、避免温莪术病原菌抗药性的出现,在提高经济效益的同时,保护生态环境。本实验以温莪术凝集素为筛选工具,从温莪术根际筛选高效的固氮菌、溶磷菌和解钾菌,并测定筛选出优良菌株的铁载体产量及其他生理活性。将温莪术根茎磨碎、脱脂、甲酸浸提,硫酸铵盐析沉淀后得到温莪术凝集素的粗品,粗品经甲壳素层析后得到温莪术凝集素纯品产率为0.046mg/g。温莪术凝集素的血凝活性为16,比活力为8648.65HU/mg。从温莪术根际筛选出44株根际微生物,其中固氮菌13株、溶磷菌17株、解钾菌14株;可以与温莪术凝集素发生特异性反应的固氮菌有8株、溶磷菌10株、解钾菌8株。用CAS法对温莪术根际菌铁载体产量进行测定,筛选出的44株温莪术根际促生菌中有14株达到“5+”水平,其中固氮菌4株、溶磷菌6株、解钾菌3株。用CAS法测定菌株WEP0500、WEN0101、WEN0102铁载体产量,结果均为“5+”水平。用改良CAS法对三株菌的铁载体产量进行测定,结果表明菌株WEN0102稀释4倍时铁载体产量仍为“5+”水平;菌株WEP0500稀释2倍时铁载体产量为“5+”水平;菌株WEN0101稀释2倍时铁载体产量下降到“4+”水平,三株菌铁载体产量由高到低依次为WEN0102、WEP0500、WEN0101。利用邻二氮菲与Fe2+的显色反应测定菌株WEN0102、WEP0500、WEN0101结合Fe3+的能力,菌株WEN0102结合Fe3+的最大量为1985.7μmol/mL,菌株WEN0500结合Fe3+的最大量为624.0μmol/mL,菌株WEN0101结合Fe3-的最大量为570.μmol/mL。对6株具有高温莪术凝集素亲和性和高铁载体产量的菌株进行初步鉴定,WEK0101、WEP0500为假单胞菌(Pseudomonas spp.); WE02、WEP0200为乳杆菌(Lactobacillus spp.); WEN0101为固氮菌(Azotobacter spp.); WEK0102为微球菌(Micrococcus sp.)。
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