七氟烷与不同浓度氧气相互作用对老年小鼠海马nNOS、caspase-3和突触素的表达及认知功能的影响

来源 :北京市结核病胸部肿瘤研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:forreg
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目的:术后认知功能障碍(Postoperative Cognitive Dysfunction, POCD)是指患者在术后产生人格、社交能力及认知能力和技巧的障碍,同时出现记忆力、集中力下降,老年患者发病率较高。POCD严重影响患者的生活质量,且延长患者住院时间,增加住院费用,给患者及其家庭带来极大的负担。POCD的发病机制目前还未完全阐明,主要集中于神经退行性变和细胞凋亡、神经炎症两方面。Caspase-3是细胞凋亡的关键分子,一氧化氮(Nitric Oxide,NO)在学习与记忆过程中发挥重要作用,NO不稳定,现多以生成一氧化氮合酶(Nitric OxideSynthase,NOS)表示NO的活性,神经型一氧化氮合酶(Neuronal nitric oxidesynthase,nNOS)是NOS的一种。七氟烷是目前常用的吸入麻醉药,术中持续吸氧是目前临床麻醉中预防缺氧的主要措施,七氟烷与吸氧对术后认知功能的影响还未阐明。本研究正是探讨七氟烷与不同浓度氧相互作用对老年小鼠海马nNOS、半胱氨酸蛋白酶(caspase-3)和突触素的表达及认知功能的影响。方法:健康雄性C57/BL6老年小鼠(14月龄)110只,采用随机数字表法,将其随机分为5组:高浓度氧组(HO组,n=22):吸100%的氧4h;高浓度氧+七氟烷组(HS组,n=22):吸100%的氧+2.5%的七氟烷4h;中浓度氧组(MO组,n=22):吸40%的氧4h;中浓度氧+七氟烷组(MS组,n=22):吸40%的氧+2.5%的七氟烷4h;对照组(Con组,n=22):吸空气4h。采用Morris水迷宫法研究五组小鼠麻醉后连续五天找到平台所用的时间(逃避潜伏期)和第五天去除平台后,90s内穿过原平台的次数。利用蛋白质印记(Western Blot)法检测小鼠海马nNOS、caspase-3的表达。利用免疫荧光技术检测小鼠海马CA1区突触素的表达。结果:与Con组相比,MO组的穿越平台次数增加(P=0.0028),nNOS在海马的表达水平显著增加(P=0.0396),突触素在小鼠海马CA1区的表达增加(P=0.0067),caspase-3在海马的表达水平无显著差别;HO组的nNOS表达水平显著增加(P=0.0317),但穿越平台次数、caspase-3及突触素表达水平均无显著差别;MS组的穿越平台次数、nNOS、caspase-3及突触素在海马区域的表达水平均无显著差别;HS组的穿越平台次数降低(P=0.0227),caspase-3表达显著增加(P=0.0359),突触素表达显著降低(P=0.0007)。MO组与HO组相比,穿越平台次数显著增加(P=0.0002),突触素在小鼠海马CA1区的表达增加(P=0.0434);MO组与MS组相比,穿越平台次数显著增加(P=0.0002),突触素在小鼠海马CA1区的表达显著增加(P=0.0009);HS组与HO组相比,穿越平台次数显著减少(P=0.0134),caspase-3在海马的表达水平显著增多(P=0.0199),突触素在小鼠海马CA1区的表达显著减少(P<0.0001);HS组与MS组相比,穿越平台次数显著减少(P=0.0019),caspase-3在海马的表达水平显著增多(P=0.0132),突触素在小鼠海马CA1区的表达显著减少(P=0.0075)。结论:1.吸入40%的氧可有效改善老年小鼠认知功能,而吸入100%的氧对老年小鼠认知功能无影响;2.2.5%的七氟烷与100%的氧同时吸入导致老年小鼠产生认知功能障碍;3.2.5%的七氟烷与40%的氧同时吸入对老年小鼠的认知功能无影响;4.2.5%的七氟烷与100%的氧同时吸入增加老年小鼠海马caspase-3的表达、诱导细胞凋亡和减少突触素的表达。
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