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哮喘患者存在Th1／Th2免疫反应失衡，以Th2反应为主导致气道炎症。在抗原递呈过程中树突状细胞(DCs)和T细胞所处的细胞因子微环境是决定T细胞Th1／Th2分化方向的关键因素。DCs分泌IL-12与IFN-γ使初始辅助性T细胞向Th1极化。T-bet基因是IFN-γ基因特异性转录因子，可以特异性上调IFN-γ的表达。目前尚无实验证实T-bet基因修饰的DCs能否高分泌IFN-γ。如果T-bet基因修饰的DCs能够高表达IFN-γ，则可以用于提高抗原递呈过程中DCs和T细胞所处细胞因子微环境中的IFN-γ，达到逆转哮喘Th2反应的目的。但目前治疗手段尚不能达到在抗原递呈水平干预T细胞的Th1／Th2分化方向，达到阻抑气道炎症的目的，有关试验研究也未见报道。 基于以上认识，本实验课题旨在研究在抗原递呈水平干预哮喘Th1／Th2分化的哮喘治疗策略的可行性，以及T-bet基因在DCs表达能否促进DCs IFN-γ的分泌以及高分泌IFN-γ的T-bet基因修饰的DCs能否逆转哮喘Th2反应，从而阻抑哮喘气道炎症的发生和发展。本实验课题以RT-PCR方法获得小鼠T-bet基因，以基因工程方法构建了小鼠T-bet重组腺病毒载体，以293A细胞包装获得了T-bet重组腺病毒。同时，以重组细胞因子mGM-CSF、mIL-4从小鼠骨髓单个核细胞诱导培养获得了小鼠树突状细胞。然后以T-bet重组腺病毒转染小鼠树突状细胞获得了T-bet基因修饰的树突状细胞。以ELISA方法检测T-bet基因修饰的树突状细胞可以高表达IFN-γ。最后，通过将T-bet基因修饰的树突状细胞经静脉注射注入OVA致敏的小鼠体内，以ELISA检测小鼠血浆IFN-γ和IL-4表达水平分别代表体内Th1和Th2反应，以流式细胞术检测小鼠外周血Th1／Th2细胞亚群，气道炎症用病理切片HE染色确定，经气道炎症阻抑试验和气道炎症逆转试验结果显示，哮喘模型小鼠存在Th1／Th2反应失衡，为Th2优势反应。T-bet基因修饰的树突状细胞注射后小鼠血浆IFN-γ升高，IL-4降低，小鼠转为以Th1反应为主，并且气道炎症完全消失同正常小鼠。