【摘 要】
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背景子痫前期（pre-eclampsia,PE）是一种严重威胁母儿健康的妊娠并发症,其发病机制尚未完全明确。胎盘滋养细胞浸润不足可造成流产、子痫前期等妊娠期疾病,而侵袭过度则会导致绒毛膜癌等疾病的发生。Gastrokine 1（GKN1）,也称为AMP18（18 kDa胃窦黏膜蛋白）,是一种分泌蛋白,表达于胃窦和胃底表面黏膜细胞,通过调节增殖和分化抑制肿瘤侵袭,并通过诱导特定信号通路介导细胞凋亡。
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背景子痫前期（pre-eclampsia,PE）是一种严重威胁母儿健康的妊娠并发症,其发病机制尚未完全明确。胎盘滋养细胞浸润不足可造成流产、子痫前期等妊娠期疾病,而侵袭过度则会导致绒毛膜癌等疾病的发生。Gastrokine 1（GKN1）,也称为AMP18（18 kDa胃窦黏膜蛋白）,是一种分泌蛋白,表达于胃窦和胃底表面黏膜细胞,通过调节增殖和分化抑制肿瘤侵袭,并通过诱导特定信号通路介导细胞凋亡。目前的研究集中在探索GKN1的肿瘤抑制特性及其在胃肠道肿瘤疾病治疗中的潜在临床应用,对GKN1在其他器官系统中的表达和功能研究甚少。有研究表明GKN1在正常妊娠中的胎盘以及妊娠滋养层疾病中表达,并且GKN1定位于胎盘绒毛外滋养细胞。胎盘组织基因阵列分析表明GKN1在胎盘中的表达水平相当高。目的研究正常妊娠和子痫前期胎盘组织中GKN1 mRNA及蛋白质的表达情况;利用体外细胞学实验的方法研究GKN1对子痫前期患者胎盘滋养细胞迁移、侵袭和增殖的影响;通过GKN1与JAK-STAT信号通路的关系研究了解其发挥作用的生物学机理;旨在探究子痫前期的发病机制加速疾病的治疗进展。方法1.收集正常妊娠和子痫前期患者胎盘组织各30例,Western blot检测GKN1蛋白的表达;免疫组化检测胎盘组织中GKN1的表达;qRT-PCR检测GKN1 mRNA的表达。2.低氧1%环境下体外模拟子痫前期培养HTR-8/Svneo细胞,并通过qPCR以及Western blot检测HTR-8/Svneo细胞中GKN1的表达变化来进行验证。3.通过小干扰RNA对低氧1%环境下培养的HTR-8/Svneo细胞进行转染处理来敲降GKN1。然后进行MTT实验和EdU实验检测细胞增殖能力,划痕实验检测对迁移的影响,Transwell检测侵袭能力。4.Western blot检测敲降 GKN1 对低氧条件下 HTR-8/Svneo细胞中 p-JAK2、JAK2、p-STAT3和STAT3的表达变化的影响。结果1.子痫前期患者胎盘组织GKN1 mRNA及蛋白表达水平高于正常妊娠组,差异有统计学意义（P＜0.01）。免疫组织化学结果显示,子痫前期患者的胎盘组织中GKN1的表达增加。2.HTR-8/SVneo细胞在低氧条件下培养,GKN1的mRNA蛋白表达水平均较正常培养状态显著增加（P＜0.01）。3.低氧条件下GKN1敲低导致HTR-8/SVneo细胞的迁移能力增加,增殖和侵袭能力显著加强。4.GKN1敲低时低氧条件下的HTR-8/Svneo细胞中p-JAK2和p-STAT3蛋白质表达水平增加,JAK-STAT信号通路被激活。结论1.子痫前期患者胎盘中GKN1在翻译及转录水平表达增高,推测GKN1可能参与了子痫前期的发病机制。2.GKN1抑制滋养细胞的增殖、迁移以及侵袭,GKN1参与子痫前期的发病可能是通过胎盘浅植入来完成。3.GKN1可能通过调控JAK-STAT信号通路参与子痫前期的发病。
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