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目的胃癌是目前世界上最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率均居全球和我国第二位。胃癌的发生发展的分子机制一直是生命科学研究的热点问题,转录因子的异常可能参与其发生发展。分化型胚胎软骨发育基因1(Differentiated embryo-chondrocyte expressed gene1, DEC1)是bHLH蛋白家族的一个成员,是广泛表达于大多数正常组织含有碱性螺旋-环-螺旋结构域的转录因子,并调节着机体正常的生理节律、自身免疫以及免疫细胞内环境的稳定。DEC1启动子区域包括数个GC盒,5’端有多个转录起始位点,其中包括cAMP元件以及多个E-box元件。DEC1广泛表达于大多数正常组织,并参与细胞的增殖、分化、肿瘤的发生和免疫调节。生长因子、UV、营养、低氧、感染及激素可以调控DEC1基因的表达。研究发现DEC1在很多肿瘤细胞系如白血病、结肠癌、肺腺癌、神经胶质瘤、肾癌中存在高表达。DEC1蛋白由412个氨基酸组成,广泛表达于大多数正常组织,可通过结合靶基因启动子的E-box序列或通过蛋白-蛋白之间的相互作用发挥转录调节活性。本研究以胃癌MGC-803细胞为研究对象,采用pGEM-T作为载体,构建pcDNA3-DEC1真核表达质粒,利用脂质体介导的转染技术增加胃癌细胞MGC-803株DEC1基因的表达,观察过表达后胃癌细胞中DEC1表达水平,并探讨DEC1对胃癌细胞增殖的影响,结合相关研究进一步发现胃癌肿瘤治疗的新思路。方法1.复苏,培养胃癌MGC-803细胞株,至对数生长期并传代。2.提取人胃癌MGC-803细胞总RNA,并扩增获得DEC1基因。3.构建pcDNA3-DEC1真核表达质粒,脂质体介导转染MGC-803细胞。将细胞分为pcDNA3-DEC1组、pcDNA3组(阴性对照)、空白对照组。4.RT-PCR检测转染后3组MGC-803细胞中DEC1mRNA的表达。5. Western Blot方法检测转染后3组MGC-803细胞中DEC1蛋白的表达。6.MTT、免疫细胞化学法检测转染后3组MGC-803细胞的增殖情况。结果：1.经鉴定成功构建pcDNA3-DEC1真核表达质粒。2.RT-PCR方法检测转染MGC-803后DEC1mRNA水平比阴性对照组和空白对照组明显增高。3. Western Blot方法检测转染MGC-803后DEC1蛋白表达水平比阴性对照组和空白对照组明显增高。4.四甲基偶氮唑蓝法(MTT)、ki-67细胞免疫化学试验显示过表达DEC1后MGC-803增殖较对照组明显。结论：1.构建的pcDNA3-DEC1真核表达质粒经PCR鉴定和测序分析,证实与设计一致。2.脂质体介导pcDNA3-DEC1真核表达质粒转染入胃癌细胞MGC-803增强了DEC1mRNA和蛋白水平的表达。3.DEC1表达水平的增高能够明显增强胃癌细胞的增殖能力。